VD大鼠海马神经血管单元损伤机制及脑通汤的干预作用研究

血管性痴呆（VD）的主体病因是脑缺血，海马与认知、记忆功能密切相关，也是脑缺血后最易受损的区域；神经血管单元（NVU）是脑的整体功能单位，脑缺血时存在整个NVU的损害；因此我们推测VD的发生可能与海马NVU的缺血损害密切相关，对NVU的整体干预可能是防治VD的最有效措施。鉴于目前缺乏从NVU角度研究VD的现状，本课题在前期研究结果的基础上，以NVU为研究靶点，以脑通汤为干预因素，通过四血管法制作VD大鼠模型，通过功能磁共振、磁共振灌注成像技术动态观察VD大鼠NVU的功能改变，利用光镜、免疫组化技术了解VD大鼠NVU的病理改变，通过体外细胞培养技术分别观察脑通汤含药血清对NVU中星形胶质细胞、微血管内皮细胞、神经元的影响，以揭示VD发病过程中NVU这一整体功能单位中的主要组分星形胶质细胞、微血管内皮细胞、神经元的损伤机制、病理联系以及脑通汤的干预作用，为脑通汤的作用机理提供实验依据。

课题组收集、整理了中医药治疗血管性痴呆（VD）的古今文献资料，提出VD早期的病因病机主要是“脾气亏虚，清阳不升，虚阳上浮，脑络瘀阻，脑髓失养”，治宜“益气升阳活血”，并对脑通汤治疗血管性痴呆的作用机制作了全面总结，其有多方面的VD治疗效应，为进一步指导临床应用提供了理论依据。本研究运用磁共振波谱成像技术检测了VD大鼠海马区神经元、星形胶质细胞的代谢改变，结果显示脑通汤可改善神经元的受损或丢失并抑制胶质细胞过度增生；运用磁共振灌注成像评价脑通汤对早期VD大鼠海马区血流量变化，结果显示脑通汤可改善大脑海马区血流量的变化。机制研究表明，脑通汤对海马神经元缺氧/复氧损伤具有保护作用，其作用靶点与其抗氧化、抗凋亡作用有关；其次，脑通汤脑通汤对缺氧/缺糖损伤的海马星形胶质细胞具有保护作用，其作用靶点与其抑制炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6的表达，上调抗氧化酶HO-1、NQO1、BDNF及其受体TrkB基因表达有关；其三，脑通汤对微血管内皮细胞缺氧/复氧损伤有保护作用，其作用靶点与其抑制BDNF基因下调，上调EBA蛋白及Claudin-5、ZO-1、HIF-1α、VEGFmRNA的表达，下调MMP-9、 NF-kB、ICAM-1、COX-2mRNA的表达有关。综上所述，脑通汤对VD神经血管单元具有保护作用，这为临床运用和进一步研究该方提供了理论基础和实验依据。通过本课题研究培养人才11人，其中教师6人，硕士研究生5人；完成科研学术论文10篇（核心期刊6篇，一般期刊4篇），其中已发表论文9篇，有1篇论文已录用，硕士毕业论文5篇。