拔罐疗法干预寒凝血瘀证产生“通络”效应的机制研究

The cupping therapy acts on the skin areas, from exterior to interior, producing an effect of "dredging collateral and activating blood". Though it is extensive in clinical application, there has been less research on its mechanisms. Through the previous job buildup, the researchers consider that improving microcirculation during the collateral-dredging effect is one of the main mechanisms in the complicated functionary of the cupping therapy. Some data indicates that underpressure can make skin expansion,in addition the expression of vascular endothelial growth factor ( VEGF) and epidermal growth factor ( EGF) enhances significantly in the expanded skin. This project will, (1) do research on the intervention mechanism of the cupping to local microcirculation to the healthy subjects and patients with blood stasis cervical spondylosis by researching the skin blood flow, the oxygen metabolism with laser speckle imaging and po 2 sensor needle. (2) detect peripheral vasoactive substance （TXB2, 6-Keto-PGF1α, ET and so on）, growth factor （VEGF, EGF）and inflammatory factor （protein and genetic expression of IL-1?， COX-2 and so on）by techniques such as immunohistochemistry and molecular biology on the platform of congealing cold and blood stasis animal models made by the mini pig that is similar to human skin's organisition structure. To run a study of the effects of mechanism of the cupping therapy on multistrata and multilevel. Meanwhile the scientific connotation of the cupping therapy is implied, and also the significant experimental evidences to its' clinical application is offered.

拔罐疗法作用于皮部，由表及里，起到通络活血作用，其临床应用广泛，但机制研究相对较少。课题组经前期工作积累，认为通络效应中改善微循环为拔罐疗法复杂作用的主要机制之一。资料表明负压可使皮肤扩张，扩张皮肤中血管内皮生长因子(VEGF)、表皮细胞生长因子(EGF)的表达明显增强。本项目（1）采用laser speckle imaging（激光散斑血流仪）、氧传感针研究拔罐对健康人及血瘀颈椎病患者的皮肤血流量、氧代谢等对局部微循环的干预机制；（2）以与人皮肤组织结构相似的小型猪复制的寒凝血瘀模型为平台，采用免疫组化、分子生物学等技术，检测外周血管活性物质（TXB2、6-Keto-PGF1α、ET等）、生长因子（VEGF、EGF）以及炎性因子（IL-1? ， COX-2等的蛋白和基因表达），进行多层次、多水平拔罐疗法通络效应机制研究。揭示拔罐疗法科学内涵，为临床应用提供重要实验依据。

拔罐疗法作为中医学传统治疗方法之一，实践经验丰富、临床应用广泛，但机制研究相对较少，本项目观察了拔罐对健康人皮肤的血流量、氧代谢等局部微循环的影响；并以寒凝血瘀动物模型为平台，采用放射免疫法检测了拔罐前后外周血管活性物质，结合局部皮肤细胞因子及炎性因子的变化研究拔罐疗法“通络”效应机制，揭示拔罐疗法科学内涵，促进拔罐疗法的临床应用。 .研究一：运用经络罐通仪以恒定罐压在健康受试者大椎穴处拔罐，通过激光散斑血流仪、经皮氧分压监测仪对拔罐前后项背部血流量、经皮氧分压变化进行监测。拔罐可引起大椎及周围穴位皮肤血流量升高，距离拔罐区域越近血流升高越明显。.研究二：以冰冻刺激复制寒凝血瘀家兔模型，采用微循环仪观察家兔耳部、眼球结膜血管，并检测全血粘度、纤维蛋白原、血管活性物质含量。造模后血清中血管内皮生长因子（VEGF）及表皮生长因子（EGF）含量下降，血清内皮素(ET)、6-酮-前列腺素F1α（6-Keto-PGF1α ）、血栓素B2(TXB2)、白介素1β（IL-1β）含量均升高，拔罐干预可使血清中VEGF、EGF上升，且家兔耳部、眼球结膜血管管径改善，进一步佐证传统医学所说拔罐具有“活血通络”作用。.研究三：采用免疫组化法检测寒凝血瘀家兔拔罐局部皮肤细胞因子VEGF和炎性因子一氧化氮合酶（iNOS）等含量的变化，造模后VEGF含量降低，拔罐干预治疗使其回升。iNOS含量升高，拔罐疗法使其降低。拔罐对局部皮肤的负压刺激，能使VEGF含量增高，血管扩张，促进局部血液循环，局部皮肤组织iNOS降低，减轻炎症反应，这可能与拔罐疗法 “通络”局部起效的始动环节相关。.总之，通过对人体局部血流量的研究证实拔罐具有改善局部微循环的作用；对动物模型的耳部及球结膜的微血管管径改变与外周血中生长因子及外周血管活性物质检测，证实拔罐具有扩张微血管和升高活性物质的作用；通过研究局部皮肤的细胞因子、炎性因子的蛋白表达，证实拔罐局部血管扩张，炎症反应减轻。推断，拔罐疗法首先对局部皮肤产生良性物理刺激，改善微循环，通过影响细胞因子、炎性因子等表达产生持续弱刺激，形成级联反应，进而影响整体微循环，产生拔罐疗法的“通络”效应。本研究将进一步扩大样本量，从拔罐局部的生物学机制角度深入研究。.本项目正式发表论文3篇，会议论文1篇。正在培养硕士研究生2名。