ESRP在急性肺损伤后肺泡上皮细胞修复中的作用及机制研究

The interstitial fibrosis after acute lung injury(ALI) is an important cause of ALI exacerbation and death. The epithelial mesenchymal transition (EMT) is a crucial mechanism of interstitial fibrosis, and the epithelial splicing regulatory protein (ESRP) is a key factor in the occurrence of EMT. However, whether ESRP is involved in the interstitial fibrosis of ALI is still unknown. In this study, LPS will be used to induce acute lung injury in Rosa 26 and SPC-Cre transgenic mice models. Moreover, we will apply the techniques of pathology, immunohistochemistry, RT-PCR, fluorescence quantitative PCR, western blot and so on, to clarify the occurrence and development of EMT in the process of acute lung injury, as well as the role of ESRP during this process, and to explore the molecular mechanism in regulation of ESRP expression. Our resules will provide a new method for the treatment of severe acute lung injury.

急性肺损伤（ALI）后的间质纤维化是ALI加重与死亡的重要原因，上皮间质转化（EMT）是间质纤维化的重要机制，上皮剪切调节蛋白（ESRP）则是EMT发生的关键因子，但ESRP是否参与了ALI的间质纤维化尚未见文献报道。本项目拟采用LPS致急性肺损伤、Rosa 26与SPC-Cre转基因小鼠等模型，应用病理学、免疫组织化学、RT-PCR、荧光定量PCR、Western Blot等技术，明确急性肺损伤过程中EMT的发生发展规律，以及ESRP在其中的作用与地位，并探讨ESRP表达变化的调控机制，从而为重度急性肺损伤的救治提供新的可能途径。

急性肺损伤（ALI）后的间质纤维化是ALI加重与死亡的重要原因，上皮间质转化（EMT）是间质纤维化的重要机制，上皮剪切调节蛋白（ESRP）则是EMT发生的关键因子。本项目通过研究急性肺损伤的严重程度与肺组织纤维化程度密切相关，EMT是肺组织纤维化过程中的重要病理学特征。并进一步体内外研究表明，肺损伤过程中的组织纤维化与细胞EMT发生中，上皮剪切调节蛋白（ESRP）的两个亚型，ESRP1与ESRP2的表达量均明显降低，其表达变化受TGF-β1、 bFGF调节，且ESRP在选择调节剪切作用时，FGFR-IIIb和FGFR-IIIc开关分子相互转化，采用RNAi干扰技术降低ESRP的表达，同样可以增加FGFR2 IIIc的比例。上述实验明确了肺损伤EMT过程中ESRP的作用靶点；在体外细胞实验中发现，将ESRP沉默后，E-cadherin表达降低，Vimentin表达上升，促进EMT的发生。改变ESRP的表达水平，可以改变EMT进程，可能有助于阻止纤维化的发生。