自噬通过影响免疫反应和细胞增殖反应参与Graves病的发生

The abnormal activation or blockage of autophagy is considered as an essential mechanism in a series of autoimmune diseases. However, it still remains undiscovered whether autophagy plays a role in the pathogenesis of Graves’ disease (GD). Our preliminary study shows that the mRNA level of BECN1, an autophagy marker, is significantly up-regulated in the peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) of GD patients compared with that of healthy controls, while the expression of LC3B is significantly down-regulated. However, It requires further investigations on whether autophagy affects immune response, and whether the disease specific targeted organ——thyroid tissues experience abnormal autophagy, as well as its specific effects. In this project, we plan to illuminate the abnormality of autophagy in GD patients and the correlation between autophagy and auto-antibodies by detecting the expression of autophagy-related genes. Besides, with the use of autophagy inducing or inhibiting agents, we will explore the mechanism of autophagy-related proteins in immune response and thyroid cell proliferation by culturing PBMCs under different conditions. Furthermore, GD murine model will be established. With this model, autophagy-related genes will be knocked out, and the effect of autophagy in GD thyroid follicular cells and immune cells will be studied. We hope it will provide a new therapeutic approach for GD patients.

自噬（autophagy）的异常活化或活化受阻是多种免疫相关疾病中的重要环节，但其是否参与Graves病（Graves’ disease, GD）的病理进程尚有待阐明。我们前期研究发现GD患者外周血自噬相关蛋白BECN1的mRNA水平明显升高，而LC3B的mRNA表达明显下调，但自噬是否影响了免疫应答，自噬在GD的靶器官——甲状腺组织中是否存在异常，其发挥的作用又是什么，这些问题都有待揭示。本项目拟通过检测GD患者外周血及甲状腺组织中自噬相关基因的表达，分析其是否存在异常以及其与患者临床和实验室指标的相关性；通过条件差异性外周血单个核细胞（PBMC）及甲状腺滤泡细胞培养，且在自噬诱导剂与抑制剂作用下，分析自噬相关蛋白对免疫细胞功能及对甲状腺细胞增殖的影响；在此基础上建立GD小鼠模型，并选择性敲除自噬相关基因，进一步探讨自噬对GD小鼠产生的作用。该项目可为GD提供新的治疗靶点。

近年研究认为，自噬不仅仅是对多种病理生理过程（例如炎症、肿瘤、心血管疾病等）的适应性反应，还可能是诱发自身免疫的原因。Graves病（Graves’ disease , GD）是最常见的器官特异性自身免疫的疾病，其发病机制尚不明确。兼之自噬与凋亡间有密切的联系，因此 Graves 病可能受到自噬异常的影响。本项目拟通过检测GD患者外周血及甲状腺组织中自噬相关基因的表达，分析其是否存在异常以及其与患者临床和实验室指标的相关性；通过条件差异性人外周单个核细胞(PBMCs)培养，且在自噬诱导剂与抑制剂作用下，分析自噬相关蛋白对免疫细胞功能及对甲状腺细胞的影响；进一步探讨自噬对GD产生的作用。该项目可为GD提供新的治疗靶点。.实验证实：. 1. 自噬关键基因PRDM1/ATG5/IRGM的多态性位点rs6568431、rs548234、rs6937876、rs10065172、rs13361189和GD的发病具有显著联系，可能是GD发病的致病因素之一。. 2. 人PBMCs及CD4+/CD8+ 细胞存在明确自噬现象；GD外周血PBMCs存在自噬降低及凋亡升高的现象，GD患者的甲状腺滤泡上皮细胞存在显著的自噬现象。. 3.进一步自噬相关基因微阵列研究发现，在GD组中，与自噬相关的20个基因在的表达是显著上调的，7个基因的表达是下调的。. 4. 通过PI3K/AKT/mTOR途径调节自噬，可以改变GD的外周免疫细胞的凋亡水平。对自噬的干预有望为GD治疗提供新靶点。.我们将以上结果总结为：Graves病患者血外周血T细胞自噬水平呈现抑制状态；但Graves病患者多数自噬相关基因的表达反而上升；Graves病患者MTOR这一关键的自噬抑制信号的表达也明显上升；抑制 MTOR信号及调节自噬水平可导致细胞凋亡水平的变化；甲状腺组织中淋巴细胞的自噬情况尚需观察。