原发免疫性血小板减少症中TYK2调节IL-23/IL-17轴在其发病中的作用及机制研究

Primary immune thrombocytopenia (ITP) is an autoimmune-mediated bleeding disorder that is characterized by decreased platelet count. Our recent studies indicated that circulating CD4+IL-17+ (Th17) cells are increased in ITP patients; IL-23/IL-17 axis participates in the pathogenesis of ITP. Tyrosine kinase-2 (TYK2), a member of the JAK family of kinase, mediates the signals triggered by various cytokines. Extensive studies of mice that lack TYK2 expression indicate that the IL-23 pathway is compromised. Therefore, we think that TYK2 maybe by regulating IL-23/IL17 axis to participates in the pathogenesis of ITP. But the mechanisms remain to be further explored. Herein, we used ITP patients; NK-92 cell line and ITP model by flow cytometry; real time PCR; meso scale discovery technology (MSD) and small interfering RNA to investigate the role of TYK2 in the pathogenesis of ITP. We attempted to elucidate the relation between Th17 network (including IL-23 and IL-17) and ITP; the mechanism of TYK2 in regulating IL-23/IL-17 axis; the role of TYK2 in the pathogenesis of ITP. The study will further reveal the mechanism of ITP and provide a new thought for specific treatment.

原发免疫性血小板减少症（ITP）是一种以血小板减少为主要表现的自身免疫介导的获得性出血性疾病。我们前期研究发现ITP患者Th17细胞比例升高，IL-23/IL-17轴参与ITP的发病。非受体酪氨酸激酶（JAKs）家族成员TYK2是细胞因子信号通路关键蛋白之一。TYK2缺陷小鼠模型提示TYK2参与IL-23信号通路。TYK2可能通过调控IL-23/IL-17信号通路，导致ITP的发生。但有关机制还有待进一步探讨。因此，我们拟采用ITP患者标本、NK-92细胞系以及ITP小鼠模型，运用流式细胞术、荧光定量PCR、高通量电化学发光术（MSD）、RNA干扰等技术，从分子、细胞、蛋白及动物整体水平等多方面探讨TYK2在ITP发病中的重要作用，明确ITP患者中TYK2调控IL-23/IL-17轴的机制。本研究从TYK2这个新视点为进一步揭示ITP的发生机制奠定基础，为ITP的治疗提供新的思路。

原发免疫性血小板减少症（Primary immune thrombocytopenia，ITP）是一种以血小板减少为主要表现的自身免疫介导的获得性出血性疾病。体液免疫异常是ITP发病的经典机制，细胞免疫异常亦是本病发生的重要环节。此外，固有免疫也参与了ITP的发生发展。该课题通过研究IL-23和Th17细胞与ITP患者的发病及疾病状态的关联，以及探索IL-23/Th17细胞轴参与ITP发病的信号通路，进一步解析ITP形成的分子机制，为寻找ITP治疗有效的预测指标，制定个性化治疗方案来改善ITP患者治疗效果提高其生活质量提供理论依据。本课题研究结果发现初发ITP患者经大剂量地塞米松（HD-DXM）治疗缓解后血清IL-23的表达水平明显比治疗前低（p=0.02）。初发ITP患者Th17细胞与正常对照相比显著增多（p=0.03）。JAKs-STATs作为细胞因子受体介导的主要信号传导途径，参与细胞的发育、分化、成熟、凋亡、功能表达以及免疫调节等重要生物学过程。STAT3是决定CD4+T细胞向Th17细胞分化还是向Treg细胞分化的重要影响因素。本课题采用流式细胞术（FCM）进一步研究了ITP患者CD4+T细胞STAT3磷酸化情况。结果显示ITP患者治疗有效组治疗前STAT3磷酸化基线（即未经过体外IL-6刺激）明显比治疗无效组治疗前高（p=0.002），而且其与正常对照组相比有所升高但无统计学差异。治疗无效组治疗前STAT3的磷酸化基线明显比正常对照组低（p=0.025）。这些结果提示IL-23/Th17细胞轴参与了ITP的发病机制。ITP患者STAT3磷酸化基线水平高且其HD-DXM治疗效果较好，这也许可以作为HD-DXM疗效的一个预测指标。通过资助本课题发表SCI2篇；本基金资助培养已毕业博士研究生1名。