CBX8靶向EGR1促进肝癌浸润转移的机制研究

Hepatocellular carcinoma (HCC) is one of the most prevalent manlignancies with high morbidity and mortality. However, the nature of HCC progression remains elusive. Previous data suggest that CBX8 plays an important role in HCC progression. In preliminary study, we found that (a) CBX8 was up-regulated and significantly associated with poor prognosis, (b) CBX8 overexpression markly up-regulated EGR1 and promote cell proliferation and migration, (c) CBX8 expression was modulated by HBx, (d) CBX8 expression was closely correlated with the expresion of EGR1 and HBx in clinical HCC samples. Based on the findings, we assume that CBX8, modulated by HBx, promotes tumor invasion and metastasis via targeting EGR1. In this study, we aim to detemine the expression of CBX8 and EGR1 and the clinical significances in HCC, to disclose the regulation of CBX8, and to reveal the mechanism via which HBx-CBX8-EGR1 promotes cell proliferation and migration in HCC. Our study is likely to provide not only solid evidence that CBX8 is involved in HCC progression, but also a potential biomarker for HCC clinical management.

肝细胞癌恶性度高，预后差，已有研究表明CBX8在肿瘤发生发展中发挥重要作用，但其分子机制及在肝癌中的作用均尚未明了。我们前期观察到转录因子CBX8在肝癌中高表达，且与患者预后差相关;基因测序和预实验研究显示：①CBX8上调EGR1表达且促进肝癌细胞增殖和迁移；②CBX8表达受HBx调控；③临床肝癌样本中，CBX8与EGR1、HBx表达均呈正相关。因此，我们提出CBX8受HBx调控并靶向EGR1，促进肝癌细胞浸润转移的假说。本项目拟采用一系列免疫学及细胞生物学实验，构建细胞及动物模型，在蛋白表达及细胞功能上，明确CBX8和EGR1在肝癌中的表达及其临床意义，揭示CBX8高表达的调控机制，阐述HBx-CBX8-EGR1通路在肝癌细胞增殖及迁移中的作用及其机制，从而获得CBX8参与肝癌进展的可靠证据，为诠释肝癌发生发展的分子机制和寻找肝癌治疗新靶点提供科学依据。

肝细胞癌（hepatocellular carcinoma, HCC）是最常见的恶性肿瘤之一，占癌症死亡率第3位，严重威胁着人们的健康。HCC 的恶性程度高与肿瘤的快速生长、高转移等密切相关。因此，明确肿瘤恶性进展的相关分子机制可为HCC的临床诊治提供重要参考依据。本项目综合前期研究基础和国内外研究进展，采用一系列免疫学和分子细胞生物学实验，利用多种细胞和裸鼠模型，在蛋白表达调控及细胞功能上，明确CBX8和EGR1在HCC中的表达及其临床意义，揭示CBX8高表达的调控机制，阐述HBx-CBX8-EGR1通路在HCC细胞增殖及迁移中的作用及其机制，从而获得CBX8参与HCC进展的可靠证据，为诠释HCC发生发展的分子机制和寻找治疗新靶点提供科学依据。在本项目的资助下，课题组在中山大学肿瘤防治中心及TCGA含有共计879个HCC病人的两个独立样本中发现CBX8在HCC组织中的表达显著高于癌旁组织，CBX8高表达与肿瘤大小、病理分级、临床分期和患者总生存和无疾病生存时间显著正相关。体内外实验结果显示过表达CBX8可促进HCC细胞体外增殖迁移和肿瘤体内侵袭转移。进一步的机制研究发现CBX8通过激活AKT/β-Catenin通路而发挥癌基因功能。一方面，CBX8与转录因子EGR1相互作用并维持其稳定性，从而促进β-Catenin的转录活性；另一方面，CBX8转录上调miR-365a-3p的表达，而miR-365a-3p则通过靶向下调ZNRF1，进而促进AKT的磷酸化和β-Catenin的入核。我们的数据还显示CBX8对EGF1和miR-365a-3p的调控是以非依赖PRC1的非经典形式进行的，此外，我们还鉴定出miR-410-3p表达下调是CBX8高表达的原因，miR-410-3p可靶向CBX8 mRNA的3’UTR而抑制其表达。综上一系列的结果表明CBX8在HCC中发挥癌基因角色，是HCC恶性进展的重要调控因子。上述结果已发表在肿瘤学领域Top期刊Cancer Research （2018影响因子8.378）上。. 在本项目的资助下，课题组共发表SCI论著8篇，总影响因子55.54，单篇最高14.971；参加学术交流活动9人次；共培养博士研究生7名。综上所述，课题组完成了本项目既定的研究内容与研究目标。