Creb1/CBP/P300与妊娠高血压患者肾素活性水平异常的相关性研究

妊娠高血压是一种严重威胁产妇和胎儿健康及生命的疾病。肾素-血管紧张素系统调节机体血压，肾素是该系统的限速酶，正常妊娠妇女血浆肾素活性升高，而妊娠高血压患者肾素下降，其机制尚不清楚。本课题将对肾素细胞系进行体外培养，利用质粒转染和RNA干扰手段，通过增加和降低细胞Creb1、CBP、P300基因表达，探索Creb1/CBP/P300对肾素合成的调控作用及其可能的信号通路；构建正常妊娠和妊娠高血压小鼠模型，从在体水平研究两种模型中肾素细胞Creb1、CBP、P300基因表达差异，及其与肾素活性的关系；首次利用肾素细胞Creb1、CBP、P300 特异性敲除小鼠妊娠模型，通过与正常妊娠小鼠对比，进一步探求妊娠状态下Creb1/CBP/P300对肾素合成的调节机制；同时收集临床正常妊娠与妊娠高血压样本进行检测，与动物模型数据综合分析，深入研究妊娠高血压发病机理，为该病的有效预防和治疗开拓新思路。

妊娠高血压是妊娠妇女的常见病，影响母婴健康，但目前对其发病机制研究还很有限。本课题收集正常妊娠、妊娠高血压、以及先兆子痫妇女胎盘，进行DNA甲基化和mRNA表达高通量分析，以及Westernblot，免疫组化等蛋白表达研究，检测样本间的基因差异。结果如下：.1..肾素-血管紧张素系统调节血压及电解质、体液平衡。我们对肾脏肾素细胞条件敲除CREB基因小鼠进行低钠饮食，发现CREB对肾素合成至关重要，其作用通过CBP、P300协助完成.2..通过收集的人样本发现，产前妊高症妇女循环肾素及血管紧张素II浓度显著低于正常妊娠妇女；产后两组间无差异。但妊高症胎盘组织中AT1, Ang II 和 Ang 1-7水平均显著高于正常对照组.3..DNA甲基化是基因转录的重要调节方式，参与了许多疾病的发生。我们对先兆子痫和正常妊娠胎盘组织进行了DNA甲基化和mRNA表达的高通量分析。结果表明与正常对照组相比，有1664个启动子发生了DNA甲基化变化，mRNA表达差异数为1446。通过DNA甲基化与mRNA协同分析：42个基因发生去甲基化，同时mRNA表达上调；19个基因发生DNA甲基化，同时mRNA表达下调。其中，肾素、血管紧张素转化酶、丙氨酰膜氨肽酶、西梅脱寡肽酶4个基因启动区去甲基化，转录上调。.结论：DNA甲基化的不正常调控可能是导致先兆子痫发生发展的重要因素