基于Jagged1-notch信号通路研究人参养荣汤对CRF-PEW作用机制

Chronic renal failure-Protein energy wasting(CRF-PEW)is a diseases which seriously harm human health.It’s important pathological manifestations is Skeletal muscle atrophy.There is no effective drug treatment of this disease at present.Muscle satellite cells(MSC) has a important repair effect to skeletal muscle atrophy,but this function is restrained in CRFstate. Jagged1-notch signaling pathways involved in a variety of stem cell activation and differentiation,but it’s role of CRF - PEW skeletal muscle atrophy is unclear. Our research by previous studies found that RenShenYangRongTang can improve the CRF-PEW status and affect the level of jagged1 expression, So we guess that jagged1 - notch signaling pathways involved in CRF-PEW mechanism by RenShenYangRongTang. This topic proposed by CRF PEW SD rats and cell model, construction of eukaryotic expression system to determine the role of jagged1-notch pathway in CRF-PEW; application in vivo experiment of animal models with RenShenYangRongTang to prove phenotypic effects;using RNAi technology in vitro validation to prove the role of jagged1-notch signaling in Chinese medicine;then research the role of Jagged1-notch pathway in CRF-PEWand the molecular mechanism of traditional Chinese medicine treatment.

慢性肾衰竭营养不良（CRF-PEW）严重威胁公民健康，骨骼肌萎缩是其重要病理，目前我国尚无特异性药物。肌卫星细胞（MSC）是对骨骼肌萎缩具有修复作用的干细胞，在CRF状态下功能受到抑制。jagged1-notch信号通路参与多种干细胞激活和分化，但在CRF-PEW骨骼肌萎缩中的地位尚不明确。课题组通过前期研究发现，人参养荣汤能改善CRF患者PEW状态，且影响jagged1表达水平。因此我们推测jagged1-notch信号通路参与人参养荣汤治疗CRF-PEW的机制。本课题拟通过CRF-PEW大鼠和细胞模型，构建真核表达系统确定jagged1-notch通路在CRF-PEW中的作用机制；应用体内实验验证人参养荣汤对模型动物的表型影响；采用RNAi技术体外验证jagged1-notch信号在中药作用机制中的地位；探讨jagged1-notch通路在CRF-PEW中的作用及中药治疗的分子机制。

该课题探讨了人参养荣汤对慢性肾衰竭(chronicrenalfailure，CRF)营养不良大鼠骨骼肌萎缩的改善作用及初步探讨其疗效机制。方法：雄性SD大鼠(180g-220g)，采用5／6肾切除+4％酪蛋白饮食方法制作CRF大鼠模型，手术后4周后血生化检测血肌酐、尿素氮以判断模型成功与否。模型成功的大鼠随机分为模型组，中药组（人参养荣汤）和西药组（开同），另设假手术组作为对照组。每4周给老鼠称重、记录、统计分析。治疗12周后，检测肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、白蛋 白(Alb)、血红蛋白(Hb)；取胫骨前肌、腓肠肌称重、进行病理学检测 (HE测骨骼肌横径)；western blotting检测骨骼肌中蛋白代谢/合成蛋白及jagged1-notch通路相关蛋白。结果：相比模型组，人参养荣汤和开同组治疗后大鼠的体重明显增强，并大鼠的发育有明显改善作用。模型组大鼠血清中肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、白蛋白(Alb)的水平明显高于正常组，而人参养荣汤及开同治疗后，上述指标明显改善，表明人参营养汤可改善CRF大鼠肾功能；与模型组相比，人参养荣汤治疗后骨骼肌肌纤维横径值明显增大(p<0.05），且jagged1、notch蛋白水平明显上调。结论：人参养荣汤可以减少慢性肾衰竭营养不良肾功能损伤，抑制其骨骼肌萎缩，其作用机制可能是通过调节jagged1/notch信号通过相关蛋白的水平。