GABAAR-1a介导的皮质脊髓束重塑在巨刺法改善缺血性卒中后运动功能中的作用机制研究

Ischemic stroke is a key factor in causing death and disability of people globally , acupuncture can improve the motor function effectively after ischemic stroke. Opposing Needling is one kind of acupuncture and widely applied in improving the motor dysfunction of affected extremity of patients with ischemic stroke , the curative effect is affirmative, but the mechanism is unclear. Large number of studies have shown that the relationship is very relevant between the restoration degree of motor function and the remodeling degree of the corticospinal tract in the contralateral brain regions after ischemic stroke . our research intends to use the rats with ischemic stroke as the objects and the remodeling of the corticospinal tract in contralateral side of cerebral infarction as the entry point, and uses the method of pharmacology reversibly to block the newborn lateral branch coming from the remodeling of the corticospinal tract in the contralateral brain regions of cerebral infarction and joining into the corticospinal tract of the side of cerebral infarction.By observing the change of the motor function before and after blocking to determine the role of remodeling of the corticospinal tract coming from the contralateral side of cerebral infarction in improving the limb motor function of the patients with ischemic stroke after the treatment of Opposing Needling. On this basis, we excite the Inhibitory factors GABAAR-1a which is closely associated with the remodeling of the corticospinal tract to further reveal the mechanism of Opposing Needling improving the motor function of affected limbs of rats with ischemic stroke. This research will provide scientific theories foundations for the application and extension of Opposing Needling in the early rehabilitative intervention of ischemic stroke.

缺血性卒中是人类死亡和致残的重要原因，针灸疗法可有效促进卒中患者肢体运动功能恢复。巨刺法是一种常规的针灸疗法，适用于缺血性卒中后患肢运动功能障碍的治疗，疗效确切但机制不明。研究表明，缺血性卒中后患侧肢体运动功能的恢复与梗死灶对侧皮质脊髓束的重塑密切相关，所以本研究拟以缺血性卒中大鼠为研究对象，以梗死灶对侧脑皮质脊髓束的重塑为切入点，采用药理学方法可逆性阻断巨刺后由梗死灶对侧皮质脊髓束重塑生成并交叉至对侧的新生侧枝，观察阻断前后患肢运动功能的变化情况以确定梗死灶对侧皮质脊髓束重塑在巨刺后运动功能改善中的作用。在此基础上，通过激动与皮质脊髓束重塑密切相关的抑制性因子GABAAR-1a,以进一步揭示巨刺法改善缺血性卒中后患肢运动功能的作用机制，为巨刺法在缺血性卒中后运动功能的改善中的应用推广提供科学依据。

巨刺法治疗缺血性卒中患者的运动功能障碍疗效明确但机制不明，且多数机制研究均围绕患侧脑神经再生、抑炎和抗凋亡等方面入手予以探讨，而本项目从健侧脑重塑角度入手探究了巨刺法改善缺血性卒中运动功能障碍的机制。课题组在优化大鼠MCAO模型的基础上先行验证了巨刺法改善缺血性卒中后运动功能障碍的作用，并通过神经行为学评分、大鼠抓力指数测试等评价方法肯定了巨刺法的疗效。疗效确定后通过观察健侧脑皮层GAP-43免疫荧光染色、蛋白表达以及颈髓C4-C7脊髓节段GAP-43蛋白表达在巨刺法干预前后的变化情况初步间接肯定了健侧脑皮质脊髓束重塑在巨刺法改善缺血性卒中大鼠运动功能障碍中的积极作用。为了明确巨刺后健侧脑皮层皮质脊髓束重塑是如何被诱导发生的，课题组对健侧脑皮层中的GABAAR-a1、BDNF、TrKB等与皮质脊髓束重塑密切相关的基因、蛋白表达量予以了检测，实验结果否定了GABAAR-a1在巨刺法改善缺血性卒中大鼠患肢运动功能中的介导作用，初步肯定了BDNF/TrKB信号通路的激活在皮质脊髓束重塑中的积极作用，尤其是TrKB的磷酸化在其中可能发挥着关键作用，但其是否为巨刺法在健侧脑皮层的关键作用靶点，还需后续通过阻断性实验予以进一步验证。上述研究为后续巨刺法在缺血性卒中患者运动功能障碍康复中的应用提供了重要的理论依据，同时也为运动生理学中所涉及到的“交叉迁移”现象，卒中后表现出的“联合反应”以及卒中后助其功能恢复的“镜像疗法”机制的深入研究提供了“可从健侧脑重塑角度着手”的研究思路，具有重要的临床、科研参考借价值。除上述研究成果外，该项目还培养了硕士研究生3名，公开公开发表论文6篇，其中SCI2篇，国内科技核心1篇，普刊3篇，促进了专业人才培养和研究成果的辐射推广。