赖型钩端螺旋体致病机制及免疫保护的分子学基础的研究

本研究针对钧端螺旋体发病机制及免疫保护的分子学基础，利用递转录，随机引物PCR等方法，构建强素株赖型钧体cDNA重组表达克隆并比较分析钧体强弱毒力株mRNA的差别。将扩增出的靶基因经非定向粘端连接与穿梭表达质粒PBK-CMV重组构建了既能在直核又能在原核表达融合蛋白重组穿梭质粒载体在宿主菌经热诱导表达，获得一个33.5kd的新蛋白表达产物，这一结果与国外报道一致。经体内外测定表明具有免疫原性。同时通过核苷酸序列分析和聚合酶链单链构象多态性分析获得了钧体编码基因的核酸顺序和开续框架。本研究首次为钧体致病和免疫保护基因及表达的分子学基础提供了全新的实验资料，也为发展我国新一代高效广谱的核酸疫苗奠定了基础。