从肠菌-黏膜免疫调节研究艾灸重建PI-IBS肠道稳态的效应机制

The damage of intestinal homeostasis caused by the imbalance between intestinal microbiota and intestinal mucosal immunity has been proven to be the key process of post-infectious irritable bowel syndrome (PI-IBS). Base on our previous study on the effectiveness of acupuncture and moxibustion treatment, and on the hypothesis "regulation of PI-IBS intestinal microbiota diversity and NLRP6 inflammasome-mediated intestinal mucosal immunity through moxibustion therapy is the key response mechanism on reconstructing intestinal homeostasis in treating PI-IBS", metagenomics, bioinformatics, histological and molecular biology techniques are applied to observe and verify the role of moxibustion in the regulation of PI-IBS intestinal microbiota, and further gain insights into interactions between the key species and NLRP6 inflammasome-mediated intestinal mucosal immunity in PI-IBS in order to confirm: ①moxibustion can exert clinical effects upon PI-IBS patients is closely related to the regulation of intestinal microbiota; ②The regulation of intestinal microbiota and NLRP6 inflammasome-mediated intestinal mucosal immunity through moxibustion on PI-IBS is the key response mechanism in the reconstruction of intestinal homeostasis, providing the scientific basis for moxibustion treating PI-IBS in the clinical practice.

肠道菌群与黏膜免疫的失控所引发的肠道稳态的破坏已被证实是感染后肠易激综合征（PI-IBS）发生发展的关键环节。本项目在课题组前期确证针灸有效性的基础上，围绕“艾灸对PI-IBS肠道菌群多样性及NLRP6炎性体介导的肠黏膜免疫的调节是其重建肠道稳态有效治疗PI-IBS的关键效应机制”的工作假说，运用基于宏基因组学、生物信息学、组织学以及分子生物学的各项技术从临床和实验两个层面观察和验证艾灸对PI-IBS肠道菌群的调节作用，并进一步深入观察艾灸核心调控菌种与NLRP6炎性体介导的肠黏膜免疫的交互作用以及艾灸的调控机制，以期证实：①艾灸治疗PI-IBS患者临床效应的产生与其调节肠道菌群密切相关；②艾灸对PI-IBS肠道菌群及NLRP6炎性体介导的肠黏膜免疫的调节是其重建PI-IBS肠道稳态的关键效应机制，从而为临床艾灸有效治疗PI-IBS提供一定的科学依据。

肠道菌群与黏膜免疫的失控所引发的肠道稳态的破坏已被证实是感染后肠易激综合征（PI-IBS）发生发展的关键环节。本项目围绕“艾灸对PI-IBS肠道菌群多样性及NLRP6炎性体介导的肠黏膜免疫的调节是其重建肠道稳态有效治疗PI-IBS的关键效应机制”的工作假说，运用16S rDNA高通量测序、生物信息学、组织学以及分子生物学的各项技术从临床和实验两个角度观察了①艾灸（温和灸）治疗IBS（PI-IBS）患者的临床疗效以及对肠道菌群结构和多样性的影响；②艾灸对PI-IBS大鼠肠道菌群及NLRP6炎性体介导的肠黏膜免疫的调节作用。结果证实，①艾灸（温和灸）治疗IBS患者的临床有效率达81.6%，显著优于安慰灸疗法的45.8%；②PI-IBS、IBS和健康人三组之间肠道菌群结构（门、纲、目、科、属、种各级水平）和多样性（OTU数目）存在显著差异。PI-IBS组以γ-变形菌纲、肠杆菌目、肠杆菌科、大肠埃希氏菌属及大肠杆菌相对丰度增加最为显著，卵形拟杆菌相对丰度降低最为显著为特征；IBS组以活泼瘤胃球菌和韦荣球菌相对丰度增高最为显著，梭杆菌门、梭杆菌属相对丰度降低最为显著为特征。此外，厚壁菌门/拟杆菌门比例增加，放线菌属相对丰度增加是两者的共同特征；③艾灸治疗后，患者肠道菌群结构得到显著调整，尤以属、种水平的调节最为显著；④艾灸对PI-IBS大鼠肠道选定菌（乳酸杆菌、双歧杆菌、普拉梭菌、大肠埃希菌）DNA相对丰度以及NLRP6炎性体介导的肠黏膜免疫具有调节作用，推测艾灸可能是通过调节PI-IBS肠道菌以及NLRP6炎性体活化，进而抑制下游炎症信号通路的激活，从而发挥肠黏膜免疫调节作用，缓解肠道低度炎症。以上临床与实验结果提示，艾灸对PI-IBS肠道菌群结构的调整以及肠道NLRP6炎性体介导的肠黏膜免疫的调节可能是其重建肠道稳态的效应机制之一。本项目的研究结果为临床艾灸有效治疗IBS（PI-IBS）提供了实验资料和科学依据，也为今后艾灸治疗IBS的进一步推广和应用奠定基础。