乌司他丁抑制TLR4/MyD88/NF-κB轴对心肺复苏后脑缺血再灌注损伤的保护机制研究

Improve the success rate of cerebral resuscitation after cardiopulmonary resuscitation (CPR) become a key part of the study, ulinastatin has a strong protective effect of organ function, but its specific role and molecular biological mechanisms in the treatment of ischemic heart and brain damage as well as in cognitive function after cerebral ischemia-reperfusion injury is unclear. The injury of brain cells after cerebral ischemia-reperfusion is a fast inflammatory cascade, and inflammatory reaction can exacerbate the development of brain injury. TLR4/MyD88/NF-κB pathway plays a crucial role in the course of immune inflammation, the key signaling molecules on pathways can occur directly or indirectly stimulate the development of inflammatory response. The project intends to investigate the dynamic changes of TLR4 in rat brain after CPR and the impact on downstream MyD88/NF-κB pathway. By observing different doses of ulinastatin inhibite rat brain TLR4/MyD88/NF-κB pathway and immune factors after CPR, analyse ulinastatin protection mechanisms and protect targets after cerebral ischemia-reperfusion injury, for the treatment of CPR patients open up new theoretical foundation and treatment method.

提高脑复苏的成功率已成为心肺复苏研究的关键环节, 乌司他丁有较强的脏器功能保护作用，但其在治疗缺血性心脑损害中的具体作用和分子生物学机制以及对脑缺血再灌注损伤后认知功能的影响尚不明确。脑缺血再灌注使脑的细胞产生损伤是一个快速的级联反应, 炎性瀑布反应触发后可以加剧脑损伤的发展。TLR4/MyD88/NF-κB轴在机体免疫炎症反应过程中起着至关重要的作用，通路上的关键信号分子均能直接或间接地激发炎症反应的发生与发展。本项目拟探讨心肺复苏后大鼠脑内TLR4的动态变化及对下游MyD88/NF-κB轴的影响。通过观察不同剂量乌司他丁对心肺复苏后大鼠脑内TLR4/MyD88/NF-κB轴及相关免疫因子的抑制作用，解析乌司他丁保护心肺复苏后脑缺血再灌注损伤的机制及作用靶点，为心肺复苏患者的救治开辟新的理论基础及治疗方法。

心脏骤停一直以来都是急诊医师所面临的重大难题，其以发病急和病死率高为主要特点，而心肺复苏后的神经功能的恢复更是重中之重。如何提高脑复苏的成功率已成为心肺复苏研究的关键环节。研究证实，CPR术后脑损伤与脑组织缺血再灌注损伤引起一系列的病理生理学改变密切相关，在此过程中，中枢神经系统的海马、皮层、小脑、纹状体与丘脑的“选择性易损神经元”可见变性、退化乃至坏死。脑缺血再灌注损伤包括许多环节、炎性反应是脑缺血再灌注损伤的重要机制之一，在缺血再灌注损伤中，各种炎症介质在缺血区域产生，并伴随微循环内皮细胞功能紊乱和白细胞黏附，释放大量的炎症介质会加重脑组织损伤。.TOLL样受体是一类序列高度保守的天然免疫受体家族，属于I型跨膜蛋白受体，人和鼠类脑内有众多的TLR4表达，脑缺血时所促发的血管内皮通透性改变，脑组织坏死物质释放，吸引外源性的单核-巨噬细胞、淋巴细胞趋化聚集，成为加剧炎性损伤的效应细胞，这些细胞均有丰富的TLR4表达。研究证实，TLR4及其介导的信号转导通路参与了脑缺血再灌注损伤所致的炎症反应，提示TLR4/MyD88/NF-κB可能成为临床减轻脑缺血再灌注损伤的新靶点。.乌司他丁是从成年男性尿液中提取精制而成的糖蛋白，由143个氨基酸组成，分子量为67000ku，有较强的脏器保护作用，已经广泛应用多个临床领域。有较多证据表明其具有清除自由基及抑制炎性介质释放等作用，明显减轻中性粒细胞在器官内的黏附、浸润、改善器官的缺血再灌注损伤，故其在治疗缺血性心脑损害中可能产生积极的保护作用。我们通过实验明晰心肺复苏后大鼠脑内TLR4的动态变化及对下游MyD88/NF-κB轴的影响。进而通过观察不同剂量乌司他丁对心肺复苏后大鼠脑内TLR4/MyD88/NF-κB轴及相关免疫因子的调节作用，解析乌司他丁保护心肺复苏后脑缺血再灌注损伤的机制及可能的作用靶点，为心肺复苏患者的救治开辟新的理论基础及治疗方法。