细胞衰老和SENEX基因对老年外周CD4+CD25+ Treg增强的影响

细胞衰老是哺乳动物为维护基因组稳定使细胞生长停止的信号转导过程，是细胞自身对各种DNA损伤做出的保护反应，但其过程也会伴发凋亡，使炎症因子分泌增加，损伤周围组织，累积一定程度反过来促发老年病。SENEX是2004年成功克隆与衰老相关的一个基因，最新研究发现其在血管内皮细胞应激性衰老发生和凋亡路径中发挥独特看门功能。老年CD4+CD25+ Treg增强是近年被多个研究小组证明的现象。我们认为CD4+CD25+ Treg不仅不随年龄增长出现老化、衰减，反呈积累、功能增强，可能与其独特的应激衰老保护机制有关，细胞衰老和SENEX基因发挥关键的调控作用。拟采用FACS检测分选细胞、QRT-PCR、基因转染和siRNA基因沉默、免疫印迹等方法对此进行研究，将发现SENEX基因新功能，揭示老年CD4+CD25+ Treg的生物学特性，对认识免疫衰老本质，预防和控制肿瘤等老年常见病均具有重要意义。

本项目以健康人和老年肿瘤患者为研究对象，采用流式细胞术、QRT-PCR、ELISA等方法，探索SENEX基因在老年CD4+CD25+Treg细胞积累过程中的作用和可能机制。结果显示：① 老年健康对照组CD4+CD25+CD127lowTreg细胞显著高于中青年健康对照组，而老年急性髓细胞白血病患者（初诊AML组）CD4+CD25+CD127lowTreg细胞最高，显著高于老年健康对照组和中青年AML组，中青年AML组CD4+CD25+CD127lowTreg细胞也显著高于中青年健康对照组。② 无论是中青年健康者，还是老年肿瘤患者，外周CD4+CD25highTreg细胞SENEX基因转录水平显著高于CD4+CD25-Teff细胞；但老年及老年肿瘤患者外周CD4+CD25highTreg细胞的SENEX基因转录水平均明显低于中青年健康对照，CD4+CD25-Teff细胞无显著差异”。③ 相对于健康成人组，健康老人组和老年肿瘤患者组外周血血清IL-2、IL-10、IL-17、IL-35、TNF-α、TGF-β均显著升高，即老年体内抑制性细胞因子和炎症性细胞因子都发生了明显改变。④ 体外T淋巴细胞培养及临床体内试验均显示，短期内小剂量IL-2刺激下，CD4+CD25+CD127lowTreg细胞比例明显增多，但随着作用时间延长（＞2周），逐渐向CD8 T效应细胞偏倚，CD4 T细胞比例逐渐降低，FoxP3 mRNA水平也呈现先升后降的变化趋势。结论：① 老人Treg细胞增多不仅与其自身存在独特天然的抗衰亡机制有关，可能还与肿瘤细胞等因素诱导的适应性Treg细胞生成相关。② SENEX基因对天然CD4 Treg细胞可能具有保护作用，但其具体作用机制，及其对适应性Treg细胞的作用尚有待进一步研究证实。③ 老年及老年肿瘤患者机体内的Treg和Teff之间的平衡会向抑制性T细胞漂移，这可能是老年人易患肿瘤且预后相对较差的重要原因之一，但细胞因子水平全面提升，SENEX基因转录水平却降低，可能与适应性Treg细胞被诱导产生有关，三者之间的关系有待进一步研究证实。④ IL-2具有双向免疫调控功能，IL-2的主要功能不仅是提升免疫，更重要的是激活Treg的增殖或转向分化，并维护其稳定和功能，应该重新评价和认识IL-2目前在临床中的应用，如适应症、剂量和用药时间等。