本研究小组研究工作表明地氟醚预处理可以抑制缺氧/复氧内皮细胞表面黏附分子的表达与抑制NF-kaapaB的活性且和TNFR1对TARF2的招募及激活有关。由于NF-kappaB活性调控受网络分子影响,因此本研究采用NF-kappaB功能基因分类芯片技术高通量检测地氟醚预处理对缺氧/复氧内皮细胞损伤保护调控基因差异表达,筛检影响NF-kappaB活性的调控基因,再用实时定量RT-PCR和western blot技术证实以上基因和蛋白差异表达存在;在上述研究基础上绘制出地氟醚预处理对缺氧/复氧内皮细胞损伤保护NF-kappaB活性影响分子网络机制图。
目前实验已按计划完成,按照既定计划完成细胞培养、建立内皮细胞缺氧/复氧模型、地氟醚预处理、内皮细胞核酸抽提和纯化、标记,进行流式细胞凋亡检测、MTT检测和C-IAP1、SMAC蛋白检测,验证了地氟醚对脐静脉内皮细胞缺氧/复氧损伤的保护作用。并使用NF-kappaB 功能基因分类芯片技术高通量检测地氟醚预处理对缺氧/复氧内皮细胞损伤调控基因的表达,用分子生物学信息技术(聚类分析)筛检影响NF-kappaB 活性差异表达数个调控基因,结果显示NLRP-12、NF-kappaB和地氟醚预处理有相关性,进一步wester blot检测验证了这一结果,并使用CST公司的NF-KB非经典通路的检测验证了其在地氟醚预处理中的作用。. 目前已培养了两位研究生,结果和数据已经经过处理和整理,处于投稿阶段。
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数据更新时间:2023-05-31
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