Toll样受体信号通路下游分子活性氧在LPS干扰孕期肝脏脂质代谢中的作用

前期研究发现LPS加重孕期肝脏脂质沉积。本课题进一步研究LPS对孕鼠肝脏脂肪酸合成(fas、acc、scd-1和gpat)、转运(cd36)和分解(cpt1α、cyp4a10和cyp4a14)相关基因表达的调控作用，探讨LXRα、SREBP-1c、ChREBP和PPARα在LPS调控孕期肝脏脂肪酸合成、转运和分解相关基因表达中的作用；通过比较LPS对tlr4突变型(C3H/HeJ)和tlr4野生型(C3HeB/FeJ)孕鼠肝脏脂肪酸合成、分解和转运过程的不同效应，阐明Kupffer细胞Toll样受体信号通路在LPS干扰孕期肝细胞脂质代谢过程的作用；通过观察抗氧化剂对LPS调控孕期肝脏脂肪酸合成、转运和分解相关基因表达的拮抗效应，阐明Toll样受体信号通路下游分子活性氧在LPS干扰孕期肝细胞脂质代谢中的作用。本课题为阐明孕期感染干扰肝脏脂质代谢的分子机理并制定有效防治对策提供理论依据。

细菌脂多糖（LPS）是革兰氏阴性细菌细胞壁上的特有结构，本课题组和国外相关研究资料显示，孕期接触一定剂量LPS可引起母体自身和胚胎产生一系列损伤。本课题在前期研究发现LPS加重孕期肝脏脂质沉积的基础上，重点研究LPS对孕鼠肝脏脂肪酸代谢相关基因表达的调控作用，阐明LPS激活Toll样受体信号通路在LPS干扰孕期肝脏脂质代谢中的作用，并进一步探讨Toll样受体信号通路下游分子活性氧在LPS干扰孕期肝细胞脂质代谢中的作用。结果发现：LPS处理上调孕鼠肝脏SREBP-1c核蛋白水平，下调PPARα核蛋白水平，并上调孕鼠肝脏脂肪酸合成相关关键酶基因和脂肪酸转运相关关键酶基因，下调脂肪酸分解相关关键酶基因；肝脏Kupffer细胞Toll样受体信号通路激活至少部分参加了LPS对孕期肝脏脂质代谢的干扰作用；抗氧化剂对LPS干扰孕期肝脏脂质代谢的拮抗效应不明显，不排除LPS是通过Toll样受体信号通路下游其他分子干扰孕期肝脏脂质代谢。此外，结合本课题组和研究工作的特点，同时开展了以下研究：1）研究了孕期暴露LPS对成年雌性子代代谢特征的影响。结果发现：母体孕期暴露LPS的雌性子鼠与正常对照组子鼠相比，表现出低出生体重，但继续喂养至出生后14周，与正常对照组相比，成年雌性子代未表现出加重的肝脏脂质沉积和胰岛素抵抗，提示孕期暴露LPS所致宫内生长发育迟缓未改变雌性子代代谢特征。2）研究了LPS激活胎盘Toll样受体信号通路在LPS致不良妊娠结局中的作用，结果发现：母体孕期暴露LPS引起胎盘TLR4-MyD88-NF-κB信号通路激活，引起胎盘炎症反应和氧化应激，孕期适量补充叶酸、锌均可抑制LPS激活的胎盘Toll样受体信号通路，继而有效拮抗LPS诱发的早产、死胎、宫内生长发育迟缓和畸形等不良妊娠结局。这些研究成果为阐明孕期接触LPS诱发不良妊娠结局的机理并制定防治对策提供了理论依据。