雷公藤甲素调控MAPK/ATF2级联通路干预足细胞损伤的分子机制研究

足细胞损伤是肾小球疾病发生发展的病理主因，保护足细胞是多数目前肾小球疾病治疗药物的重要药理学基础。中药雷公藤对肾小球疾病患者有显著的临床疗效。我们前期研究显示，雷公藤主要活性提取物雷公藤甲素能显著改善肾病模型大鼠足细胞病变，不依赖活性氧族（ROS）独立作用于p38丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）信号通路，提出p38MAPK是雷公藤甲素保护足细胞损伤的关键调控通路（Kidney Int，2008，2010)。本研究拟在前期研究基础上，采用转录因子活性谱芯片，结合基因转染、RNA干扰、Westernblot等技术研究确定雷公藤甲素调控的p38MAPK通路下游转录因子；染色质免疫共沉淀(chIP)和chIP芯片筛选鉴定转录因子调控的靶基因，及雷公藤甲素对靶基因表达的影响，阐明雷公藤甲素保护足细胞损伤的分子调控机制，明确其作用于足细胞的关键分子。本研究将深化雷公藤甲素治疗肾小球疾病药学机制的认识。

雷公藤甲素能显著改善肾病模型大鼠足细胞病变，不依赖活性氧族独立作用于p38丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）信号通路，我们提出p38MAPK是雷公藤甲素保护足细胞损伤的关键调控通路，本项研究显示，雷公藤甲素通过p38MAPK-ATF2-GADD45B发挥足细胞保护作用。雷公藤甲素和p38 MAPK抑制剂显著降低氨基核苷嘌呤霉素（PAN）诱导的激活转录因子2（ATF2）活性及凋亡诱导因子GADD45B表达，而GADD45B与足细胞损伤关系密切。FSGS患者肾小球GADD45B基因和蛋白表达水平显著高于正常对照组，并与FSGS患者白尿、血白蛋白及血肌酐水平密切相关；多种足细胞损伤因素，如TGF-β，PAN和LPS均可诱导GADD45B基因和蛋白表达上调。GADD45B过表达显著促进TGF-诱导的足细胞凋亡，而向足细胞中转染GADD45B siRNA 抑制其表达可降低TGF-诱导的足细胞凋亡率。