鸟类高级鸣唱核团HVC性分化的神经生物学机制

为了揭示鸟类鸣唱神经核团（HVC）性分化的神经生物学机制，本项目对HVC前体细胞在室带区产生的细胞数量及其向目的脑区迁移过程中和进入目的脑区后的细胞分化及凋亡是否存在雌雄差异以及是否受雌激素的影响进行研究：1）先利用腺病毒追踪并确定HVC室带区的发生位置； 2）通过体外培养方法，比较HVC前体细胞脑区中，新产生的细胞数量（BrdU阳性）及其细胞类型在雌雄间以及在培养基中加入雌激素后的差异；3）利用3H-TdR标记HVC前体细胞，在HVC细胞迁移过程中和进入目的脑区后，比较神经细胞的分化（GFAP抗体：神经胶质细胞； HuD抗体：未成熟神经元；NeuN：成熟神经元）及存活（凋亡）（TUNEL细胞凋亡检测试剂盒）在雌雄间以及包埋雌激素后的差异。最后，为了揭示HVC性分化中雌激素影响以外的因素，还利用抑制性消减杂交方法筛选HVC正在发生性分化过程中的雌雄鸟间差异表达的基因，并通过原位杂交确证。