PTEN抑制剂对人卵泡体外培养的影响研究

目前女性生育能力明显下降，癌症发生低龄化及癌症治疗是其重要原因之一，女性生育力保存日益受到人们的关注。现有的保存生育力方式各有其优缺点及适应症，分离卵巢组织中窦前卵泡进行体外培养结合辅助生殖技术，既可以让癌症患者获得后代，同时又能降低肿瘤细胞再感染风险。但由于窦前卵泡本身特性及人材料难获得性，人卵泡体外培养进展缓慢。.　　文献报道，PTEN基因敲除可以启动小鼠原始卵泡生长、激活原始卵泡。据此，申请者提出假设，在人卵泡体外培养系统中加入PTEN抑制剂可以促进卵泡的生长，且未见相关报道。本课题拟在已有人卵巢组织冷冻、卵泡培养的研究基础上，研究不同发育阶段卵泡PTEN表达；在培养液中加PTEN抑制剂，观察其是否能使卵泡加速激活和生长；结合3D培养体系，改进卵泡培养体系。研究建立人卵泡体外培养基本体系，为女性生育力保存提供新的方法，对癌症病人生育力保存及卵巢早衰病人获得后代有重要意义．

目前关于人的卵泡成熟机制仍然不清，各项研究表明卵泡体外培养体系存在种属差异，仅小鼠有后代出生，而在大动物和人中发展缓慢，需要深入研究人卵泡成熟机制和优化培养方案。. 在项目执行期间，项目组围绕计划书中的研究目标及主要研究内容，开展了卵泡培养体系的改善，找到合适的人单卵泡分离的方法，建立卵泡体外三维培养体系，在培养液中加入了bFGF等因子，观察到其对卵泡生长的促进作用，同时将卵泡与间充质干细胞共培养，结果显示促进卵泡生长，并利用单细胞PCR技术进行机制的初步探讨。在以上研究基础上，进行了卵泡体外激活的研究，利用PTEN的抑制剂处理卵巢组织，并进行卵巢移植，发现能够促进卵泡的早期激活。.同时，项目组利用单细胞测序技术进行了卵母细胞成熟减数分裂染色体重组机制的研究，并利用单细胞转录组测序技术进行了人胚胎发育机制的探讨。. 以上研究内容有助于优化人卵泡的体外成熟培养、为阐明卵泡成熟机制提供很好的数据，对女性生育力的保存及PGD的技术发展做出了一定贡献。共发表4篇SCI论文，其中以第一作者在Nat Struct Mol Biol以及共同第一作者在Cell杂志发表研究成果。