微米大黄炭调控脂氧素生成促胃黏膜修复作用机制研究

The number of patients suffering from non-steroid anti-inflammatory drug (NSAID)-induced damage to the gastrointestinal mucosa is increasing. And, the inflammatory response is critical to this damage. We found in our previous studies, clinical effectiveness of hemostasis in peptic ulcer bleeding and the reports of lipoxin’s effects of promoting the resolution phase of inflammation, that the carbonized micron rhubarb reduced the muscularis mucosa defect width of gastric ulcer rats and promoted synthesis and secretion of prostaglandin E2 (PGE2). Therefore, we hypothesize if the carbonized micron rhubarb could repair the gastric mucosal damage via promoting inflammation resolution. For testing this hypothesis and clarifying the damage repairing mechanisms, this study will use lipoxin A4 (LXA4) and COX-2 inhibitor as tool drugs for observing the influences of the carbonized micron rhubarb on the contents of LXs and LXA4 and the expression of the key synthetases (5-LOX, 15-LOX, 12-LOX and COX-2) of lipoxin, as well as the changes of contents of TNF-α, IL-4, IL-10 and IL-13.

随着非甾体类抗炎药的广泛使用，胃肠道黏膜损伤日趋增多, 而炎症反应是其损伤过程中发生发展的关键。基于脂氧素（LXs）作为胃黏膜损伤中发挥限制炎症发展、促进炎症消退作用的研究进展，结合我们既往以微米大黄炭治疗消化性溃疡出血的疗效基础，同时在前期研究中，我们发现微米大黄炭可减少胃溃疡大鼠黏膜肌层缺损宽度，并促进胃黏膜上皮细胞合成和分泌PGE2，微米大黄炭可能通过促进炎症消退来修复胃黏膜损伤。本研究通过整体和细胞两个层面，以脂氧素A4(LXA4)与环氧合酶-2（COX-2）抑制剂为工具药，通过检测微米大黄炭对脂氧素生成途径中LXs、LXA4含量及其合成关键酶(5-LOX、15-LOX、12-LOX及COX-2)的表达的影响，并观察其下游抗炎因子TNF-α、IL-4、IL-10、IL-13含量的变化，有望阐明微米大黄炭通过促进炎症消退而修复胃黏膜的作用机制。

脂氧素是重要的“炎症刹车”因子，通过多条途径传递抗炎信号，发挥限制炎症发展、促进炎症消退作用，已成为防治黏膜损伤新的药物作用靶点。. 本研究采用无水乙醇灌胃诱导大鼠急性胃黏膜损伤模型，通过测定各组大鼠胃黏膜一般状况、损伤指数及组织病理分析，结果表明：微米大黄炭组与奥美拉唑镁肠溶片组的损伤指数均显著低于模型组，且微米大黄炭组与正常组比较损伤指数无显著差异(P<0.05)，初步明确微米大黄炭对急性胃黏膜损伤的保护作用。. 采用ELASA法检测各组大鼠血清TNF-a、IL-6、IL-4的水平，与模型组比较，微米大黄炭组TNF-a、IL-6水平显著降低，IL-4水平显著升高(P<0.01)； 与奥美拉唑镁肠溶片组比较，微米大黄炭组TNF-a、IL-6水平下降更为明显，而IL-4水平更高(P<0.05)，明确炎症反应在胃黏膜损伤及修复作用中发挥重要作用；. 通过Western蛋白印记技术检测各组大鼠LXs合成关键酶（5-LOX、12-LOX、12-LOX）及ALX4的表达，与模型组比较，微米大黄炭组及奥美拉唑镁肠溶片组能升高15-LOX蛋白表达（P>0.01），5-LOX、12-LOX蛋白表达显著升高(P<0.01) ；与奥美拉唑镁肠溶片组比较，微米大黄炭组5-LOX升高更为明显 (P<0.05)，12-LOX蛋白表达无统计学差异（ P>0.05）；与模型组比较，微米大黄炭组胃组织中ALX-A4受体的表达水平显著升高 (P<0.01)；以上结论初步阐明微米大黄炭通过脂氧素生成途径发挥一定保护胃黏膜损伤的作用。. 综上所述，本研究表明微米大黄炭对急性胃黏膜损伤有一定的保护作用，其作用机制可能与通过促进5-LOX、 12-LOX的生成增加ALX-A4受体的表达水平，从而促进炎症消退来修复胃黏膜损伤有关。. 同时因本研究应用阿司匹林制备急性胃黏膜损伤模型的失败经历，课题组进行了《阿司匹林致大鼠急性胃黏膜损伤模型的探究》。结果显示500mg/kg阿司匹林组大鼠胃黏膜表面可见明显出血、糜烂，甚至浅溃疡形成，后期课题组将继续完成相关研究。