自由溶液毛细管电泳测定尺寸/质量新方法

本申请拟发展能准确测定蛋白质等生物大分子尺寸或质量的自由溶液毛细管电泳新方法。思路是通过"挂接"牵泳或阻泳片段于样品分子，来实现分子尺寸的精细分离。方法是设计制备电荷可调、易于检测的水溶性树枝状牵泳或阻泳挂接分子，先以模型高分子或已知尺寸的寡糖为对象，进行挂接和自由溶液电泳研究，以获得精细尺寸分离峰，进而算出分子质量，与质谱测定结果比较，待准确度相同后，再扩展到蛋白或其他生物大分子尺寸或分子量测定上。本研究如能取得成功，将会建立具有质谱特点、能直接准确测定溶液样品尺寸或分子量分布的新方法，这不仅会拓展毛细管电泳的应用范围，还可能会为生物大分子乃至人工高分子的研究开辟新的可能。

本项目以建立具有质谱特点、能准确测定合成聚合物和生物大分子的尺寸/分子量的毛细管电泳新方法为目标。通过研究，发展了以自己设计合成的多功能树枝状分子为牵泳剂的自由溶液毛细管电泳精细尺寸分离及尺寸/分子量测定新方法，包括：1）发展了多功能树枝状分子的每代反应一锅煮的逐代合成方法，制备出了满足要求的1~3代多功能树枝状分子；2）实现了多功能树枝状分子与多糖、聚氨基酸、蛋白质、聚乙二醇等聚合物的共价挂接；3）建立了挂接后复合物的自由溶液毛细管电泳精细尺寸分离方法；4）构建了分离和分子量测定模型，以聚乙二醇为模型分子，测得的分子量及其分布结果与质谱分析结果相当。发表了SCI研究论文5篇，申请发明专利1件、获专利授权1件。本工作拓展了毛细管电泳的应用范围，为研究人工合成聚合物及生物大分子的在溶液中的尺寸、分子量及其分布提供了新工具和方法。完成了预定任务。