以甘润濡养法干预食管癌细胞同质粘附探讨启膈方抑制食管癌转移的机制

基本信息
批准号:81403310
项目类别:青年科学基金项目
资助金额:23.00
负责人:李晶
学科分类:
依托单位:河北医科大学
批准年份:2014
结题年份:2017
起止时间:2015-01-01 - 2017-12-31
项目状态: 已结题
项目参与者:刘亚娴,史会娟,刘维华,高静,张玉双,袁虎方,刘淑刚,张洁,李建波
关键词:
食管癌转移甘润濡养法细胞间同质粘附启膈方上皮型钙粘附素
结项摘要

The first step of the tumor metastasis is the reduction of homogeneity adhesion between cells.E-cadherin play a important roe in the homogeneity adhesion.Based on the literatures of traditional Chinese medicine,we believe the basic pathogenesis of the esophagus cancer is Blood deficiency and Yin deficiency of stomach.Is it lead to the reduction of homogeneity adhesion?Then the cell gap junction is weakened,and epithelial mesenchymal transition emerge.Can nourishing Yin enhance the homogeneity adhesion to inhibit metastasis?Establish the hypothesis that"Qigefang which based on method of Ganrun Ruyang can inhibit metastasis of human esophageal cancer cells by intervention in homogeneity adhesion between cells" .Use gene transfection,immunohistochemistry,RT-PCR,Western blot, immunofluorescence,confocal microscopy to discuss the effects of Qigefang on the suppressions of metastasis in human esophageal carcinoma cells.Take E-cadherin as the main line to observe Qigefang's effect,as follows:Effect the expression and localization of E-cadherin and E-cadherin/catenins,effect the Wnt pathway,the cell gap junction,and the epithelial mesenchymal transitions.Then provide the basis for that the method of Ganrun Ruyang can inhibite metastasis by intervention in homogeneity adhesion between cells.

同质粘附降低是肿瘤细胞脱离原发灶发生转移的第一步,E-cadherin在同质粘附中起重要作用。参阅历代文献,我们提出噎膈(食管癌)的根本病机为“血液衰耗,胃脘干槁”。“干槁”是否导致细胞间同质粘附降低,从而使细胞间连接减弱、上皮细胞间质化发生?“濡养”能否增强同质粘附从而抑制转移?据此建立“以甘润濡养立法的启膈方增强食管癌细胞间同质粘附而抑制转移”的假说。运用基因转染、动物活体成像、免疫组化、RT-PCR、Western blot、免疫荧光、激光共聚焦显微镜等技术从整体与细胞,基因与蛋白水平系统研究启膈方对食管癌细胞同质间粘附影响的机制,以E-cadherin为主线观察启膈方的作用:对E-cadherin、E-cadherin/ catenins 复合体的表达及定位的影响;对Wnt通路的影响;对细胞间连接及上皮细胞间质化的影响。从而为“甘润濡养”法增强食管癌细胞同质粘附而抑制转移提供依据。

项目摘要

食管癌发病有明显的地域性,我国是世界上食管癌发病率和死亡率最高的国家,我国的河南林州、河北磁县、涉县和山西阳城是食管癌集中高发区,发病率是世界平均水平的10倍。. 2015年1月-2017年12月历时3年,本课题组在国家自然基金的资助下展开了题为“以甘润濡养法干预食管癌细胞同质粘附探讨启膈方抑制食管癌转移的机制(项目批准号: 81403310)”的研究,针对启膈方抑制食管癌转移的机制进行深入研究。研究基本按照原计划执行,一些研究内容稍作调整。. 研究目标基本完成,在理论方面,阐明了食管癌发生发展的核心病机为“胃脘干槁”;药物方面,成功制作启膈方的水提物,并应用超高效液相证实其可重复性,为实验的进行奠定了基础;体外实验,证实了启膈方能够增强食管癌细胞间的间隙连接(p<0.05),抑制食管癌细胞微丝骨架重组(p<0.05),抑制食管癌细胞上皮细胞间质转化发生(p<0.05),从而抑制食管癌细胞的侵袭和迁移(p<0.05);体内实验,成功制造通过尾静脉注射荧光标记KYSE150细胞裸鼠肺转移模型及皮下注射鼠源前胃癌(鳞癌)MFC细胞615小鼠肺转移模型,并证实启膈方能够抑制食管癌肺转移的发生(p<0.05),而且在延长小鼠生存,维持小鼠体重方面优于卡培他滨化疗组(p<0.05)。. 临床中我们应用启膈方治疗食管癌,发现启膈散能够抑制食管癌的转移,延长患者的生存期,改善患者的生活质量。取得了良好的经济效益及社会效益。本课题3年培养硕士研究生4名。发表学术论文6篇,其中SCI 2篇,影响因子分别为6.3和3.2;CSCD 4篇,其中《中国中西医结合》和《中医杂志》各发表1篇。主持人李晶教授应邀参加在新西兰举办的第十三届世界中医药大会,并就本课题组在食管癌方面的研究做大会发言。

项目成果
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数据更新时间:2023-05-31

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