多聚体微泡携带基质金属蛋白酶抑制剂靶向治疗原发性肝癌的实验研究

基质金属蛋白酶（MMPs）与肿瘤生长及转移有着密切相关。抑MMPs活性是抗肿瘤治疗最直接、有效的方法之一。但目前多种MMPs抑制剂类药物在局部达到治疗浓度前就因其显著的全身性副作用而停止使用，使MMPs抑制剂临床应用陷入困境。因而，寻求一种既能有效提高肿瘤内药物浓度，又能降低全身药物毒性的治疗手段是目前MMPs抑制剂抗肿瘤治疗面临的一项亟待解决的问题。本课题针对这一问题，拟采用多聚体型超声微泡，结合MMPs抑制剂形成新型微泡-药物复合体，在超声照射下，于肿瘤部位将其定点击碎，达到靶向释药、降低全身毒性的目的；并利用微泡破碎的"声空化"效应促进药物进入肿瘤细胞内发挥作用，实现药物增敏。通过观察不同的药物浓度、给药方式及给药时间等因素下肝癌及全身对药物治疗的反应，验证微泡作为新型的抗MMPs拮抗剂药物载体的可行性，并摸索微泡介导MMPs抑制剂靶向治疗肝癌的最佳条件，推进超声靶向治疗领域的发展。

化疗是肿瘤治疗的一个重要手段。但目前绝大多数化疗药物在发挥抑瘤作用的同时会引起机体严重的副作用，因而影响其最终疗效。如何选择合适的化疗药物及给药方式，使其在体内最大程度的发挥药理作用并尽量减少并发症一直是医学研究的重点。近些年发展起来的超声介导的药物靶向运输治疗肿瘤已成为研究的热点问题。本实验通过研制制备携带有药物舒尼替尼的新型多聚体微泡，利用跨膜铵梯度法制备得到包含有药物舒尼替尼的脂质体，将超声微泡和载药脂质体直接混合得到新型多聚体微泡-药物复合体。在对新型复合体进行载药能力测定之后，我们分别进行了系列的离体及在体实验研究。离体实验中，通过改变各实验组不同的药物浓度和作用时间，通过多种方法评价不同处理组的细胞生存率、细胞凋亡率及凋亡细胞微结构的变化。在体实验中，采用引瘤后原代细胞培养注射细胞悬液法建立裸鼠 RCC 皮下移植瘤模型，并随机分为空白对照组 (Control)、多聚体微泡组 (pMB)、单纯舒尼替尼治疗组 (Sunitinib) 和加载有舒尼替尼的新型多聚体微泡联合超声治疗组 (pMBS+US) 共 4 组。监测不同实验组裸鼠肿瘤生长变化、肿瘤的发展转移及药物舒尼替尼相关不良反应的发生。尽管由于原计划采用的MMP抑制剂纯品价格昂贵，我们换为了另一种抗癌药物，但整体的实验思路和靶向微泡作用原理与原课题设计完全一致，故并不影响本实验的整体效果。整体实验进展顺利，实验结果证明：无论是体内还是体外实验，最有效的RCC治疗方案都需要新型多聚体载药微泡、有效的药物舒尼替尼及超声的定点照射，且无论是体内还是体外实验，pMBS+US组都能显著抑制肿瘤细胞的增殖。新型多聚体微泡携带药物舒尼替尼在超声作用下能显著促进药物与肿瘤细胞的相互作用，可显著提高对裸鼠RCC移植瘤的生长抑制效应，同时降低药物不良反应的发生。为肿瘤靶向治疗提供了一种新型、有效的药物载体，从而为治疗肿瘤时靶向持续的药物运输提供了可能。课题研究结果已发表。