piRNA诱导基因沉默的分子机制及其在精子形成过程中的作用

在多种物种中都发现了一类生殖系细胞（germline）特异性的非编码小RNA－piRNA，它们可能以一种不同于siRNA和miRNA的干扰途径沉默基因参与配子形成，如精子发生。它们与生殖系细胞特异性蛋白PIWI相互作用，且表达似乎也与该蛋白相关。PIWI是Ago家族成员，该家族成员与RNAi效应密切相关，是RNAi机器的核心组分，暗示PIWI在piRNA介导基因沉默途径有重要功能。目前对于PIWI的结构功能及piRNA诱导基因沉默的机制等都知之甚少。本项目将研究piRNA的生物学功能；克隆人源的PIWI成员－HIWI基因，表达纯化该蛋白，体外研究它与piRNA的相互作用；利用酵母双杂交系统，筛选HIWI辅助蛋白因子，并研究它们在piRNA诱导基因沉默途径中的功能。通过本研究，不仅可以深入了解HIWI及其辅助因子的结构功能，还可以进一步揭示piRNA诱导基因沉默的分子机制及与配子形成的联系。