NALP3炎性体调控抗-GBM肾炎Th1、Th17分化的作用及机制

抗原特异性辅助T细胞（Th细胞）亚群中Th1、Th17分化异常是介导抗-GBM肾炎发病的关键机制，因此研究该病Th细胞亚群分化异常的调控机制至关重要。NALP3炎性体是巨噬细胞的一个重要免疫调控靶点，其对Th1、Th17细胞分化具有关键调控作用，但机制不清。基于NALP3免疫特性及其在肾病研究资料，我们提出NALP3对抗-GBM肾炎Th细胞分化具有关键调控作用的假说，并推测H2X7R(上游信号)/NALP3/下游IL-1β分子链条效应是其调控机制。故本课题拟先检测并明确抗-GBM肾炎该分子链条变化与Th细胞分化异常关系，分离巨噬细胞与初始CD4+T细胞体外共培养，进一步对体内、外H2X7R/NALP3/IL-1β多环节干预，检测M1巨噬细胞表型和效应、Th分化相关的关键转录调控因子和细胞因子变化，最终为NALP3炎性体对抗-GBM肾炎Th1、Th17分化的调控作用及机制阐明提供实验依据。

MRL/lpr狼疮性肾炎小鼠是典型的自身免疫性肾炎动物模型，NALP3是调控天然免疫和适应性免疫之间的关键开关分子，研究其在自身免疫性肾炎发病机制中的作用意义重大。我们以NALP3上游的P2X7分子为阻断靶点，同时构建NALP3腺病毒以干预NALP3/ASC/Caspase-1信号通路，我们发现阻断该信号通路显著降低了该通路下游分子的表达变化，并减轻了MRL/lpr狼疮肾炎病情，而体内转染NLRP3 显著增加了狼疮鼠肾炎病情。体外实验同样表明阻断该通路显著降低肾小管上皮细胞凋亡率及病变损伤,表明P2X7/ NALP3/ASC/Caspase-1信号通路在自身免疫性狼疮性肾炎发病机制中发挥重要作用。