Ⅰ型干扰素通路活化天然免疫细胞参与血栓形成在抗磷脂综合征发病机制中的研究

Antiphospholipid syndrome (APS) is an autoimmune disease charateried by of recurrent arterial,venous thrombosis,abortion and thrombocytopenia. It is usully secondary to systemic lupus erythematousis. The machnism of thrombosis caused by APS is not unclear. Previously,our study indicated that antiphospholipid antibody can bind to and interfered with the function of the co-factors, i.e. thrombin,plasmin and beta2GP1, and induced thombosis of mice model. In this study, we want to investigate if the innate immune cells,i.e.neutrophil,monocyte and DC which is plays an key role in the coagluantion and infection restriction involved in the thrombosis in APS. The cell signal pathway of type1 interferon inducing the expression of tissue factor will also be investigated. By investigating the status of the expression of tissue factor, PAR1, and annimal study to see the effect of anti-interferon α antibody, PAR recepte 1 angonist and DNase1 reducing thrombosis in vivo, we can find a clue to find new method to prevent thrombosis.

抗磷脂抗体综合征(APS)临床表现为反复的动静脉血栓、流产和血小板减少，常继发于系统性红斑狼疮等自身免疫性疾病，该疾病易发血栓的机制目前仍未明确。在我们以往的研究证实抗磷脂抗体可以通过抑制凝血相关因子和激活内皮细胞而促进血栓形成的基础上，我们拟研究在连接感染和血栓起核心作用的天然免疫细胞如中性粒细胞、单核细胞和树突状细胞在Ⅰ型干扰素的活化下参与血栓形成的机制，Ⅰ型干扰素诱导天然免疫细胞表达组织因子的细胞内信号通路,研究APS患者外周血中性粒细胞、单核细胞和DC表面组织因子和蛋白酶激活受体1（PAR1）的表达，并通过所建立的动物模型研究Ⅰ型干扰素单克隆抗体、PAR1受体拮抗剂和DNase1酶对血栓形成的干扰抑制试验，以期发现抑制APS血栓形成的新的治疗方法。为APS的新的治疗策略奠定实验基础。

抗磷脂抗体综合征(APS)临床表现为反复的动静脉血栓、流产和血小板减少，常继发于系统性红斑狼疮等自身免疫性疾病，该疾病易发血栓的机制目前仍未明确。在我们以往的研究证实抗磷脂抗体可以通过抑制凝血相关因子和激活内皮细胞而促进血栓形成的基础上，本项目旨在研究在连接感染和血栓起核心作用的天然免疫系统如I型干扰素的活化参与APS血栓形成的机制。一方面，我们横断面分析了我们在上海建立的单中心APS数据库（APS-SH）中病人入组时的临床表现和免疫学特点，我们对比分析发现了非传统的抗磷脂抗体——抗磷脂酰丝氨酸/凝血酶原复合物抗体（aPS/PT）与静脉血栓和妊娠并发症有较高的相关性。接着我们利用高通量蛋白芯片技术对数据库中病人的血清进行两万种抗体的筛选，我们发现MYO5A基因表达的肌球蛋白Va抗体的表达在APS中显著增加，而在原发APS中的表达显著高于继发APS。这些APS临床潜在诊断标志物的发现，可能推动APS疾病精准诊断的进程。另一方面，我们研究了I型干扰素通过活化天然免疫细胞/内皮细胞参与血栓形成的相关机制。我们在APS病人外周血单个核细胞中发现I型干扰素通路是异常活化的，同时APS病人中中性粒细胞产生NETs的水平是增加的。体外研究发现I型干扰素可以协同APS病人血清纯化的抗体促进NETs的释放。而使用I型干扰素刺激人单核细胞系和人脐静脉内皮细胞系后发现血栓相关蛋白Axl/Gas6表达增高。在内皮细胞中进一步研究发现I型干扰素刺通过Gas6-Axl-Akt信号通路上调组织因子（TF）的表达从而参与血栓形成。I型干扰素参与APS血栓形成这一新机制弥补了APS与SLE研究领域的部分空白，为理解APS发病机理提供了更多的理论支持，也为APS的新的治疗策略奠定了实验基础，可能为探索通过抑制血栓形成来治疗APS提供新思路。