基于cAMP途径探讨针刺干预海洛因复吸大鼠成瘾记忆作用的分子机制研究

Addictive drugs through the exception of addiction form strong, lasting memory of learning and memory.How to intervene addiction memory formation, reduce the occurrence of high relapse rate, worthy of discussion. Based on cAMP, the ways to raise is one of the key molecular mechanisms of addiction memory, in order to investigate acupuncture intervention addicted to heroin relapse in rats memory molecule mechanism as the goal, put forward "to manipulate cAMP addicted to heroin relapse in rats of acupuncture intervention may be one of memory effect" hypothesis.Horse around the hypothesis to mind as the observation point, cAMP, the way as the breakthrough point, using laser confocal fluorescent immunohistochemistry, and other modern multidisciplinary technology and methods, By observing the will, the da-zhui acupuncture point acupuncture of heroin relapse rat hippocampal synaptic plasticity (LTP), the influence of the cAMP - PKA - CREB pathways, analysis of Ca2 + - calmodulin dependent protein kinase Ⅱ (CaMK Ⅱ) and Δ FosB expression changes Discussed in this paper, the acupuncture intervention of heroin relapse is the molecular mechanisms of addiction memory in rats.To carry out the study, to explore the intervention therapy of addiction memory formation and enrich the theory of acupuncture in the treatment of encephalopathy, promote the clinical application of acupuncture and moxibustion therapy in prevention and treatment of drug addiction,as to provide theoretical basis for acupuncture detoxification, have realistic and scientific theoretical significance.

成瘾性药物通过异常的学习记忆形成强烈、持久的成瘾性记忆。如何干预成瘾记忆的形成，减少高复吸率的发生，值得探讨。基于cAMP途径上调是成瘾记忆产生的关键分子机制之一，以探讨针刺干预海洛因复吸大鼠成瘾记忆分子机制为目标，提出“调控cAMP途径可能是针刺干预海洛因复吸大鼠成瘾记忆的作用之一”的假说。围绕假说，以脑海马为观察点，以cAMP 途径为切入点，运用荧光免疫组化、激光共聚焦等现代多学科技术与方法，通过观察针刺百会、大椎穴对海洛因复吸大鼠脑海马突触功能可塑性（LTP）、cAMP-PKA-CREB 通路的影响，分析Ca2 +- 钙调蛋白依赖的蛋白激酶Ⅱ（CaMKⅡ）和ΔFosB的表达变化、探讨阐述针刺干预海洛因复吸大鼠成瘾记忆作用的分子机制。开展本项研究，对探寻干预成瘾记忆形成的疗法，丰富针刺治疗脑病的理论，促进针灸疗法在防治药物成瘾的临床应用，为针灸戒毒提供理论依据，具有现实和科学理论意义。

项目研究背景：近年来，药物成瘾所致复吸是成瘾治疗的一大难题，研究表明，海洛因成瘾会造成脑组织慢性损害，异常记忆长期存在可能是导致复吸的主要原因，因此成瘾记忆在药物成瘾研究中备受关注。那么，观察大鼠脑海马脑区cAMP、PKA、CREB的表达，是否可以阐述针刺干预海洛因成瘾记忆形成的的可能机制？.主要研究内容：本项目围绕“调控cAMP 途径可能是针刺干预海洛因复吸大鼠成瘾记忆的作用之一”的假说，以脑海马(CA3 区)为观察点，以 cAMP 途径为切入点，运用现代多学科技术与方法，通过观察针刺百会、大椎穴对海洛因复吸大鼠脑突触功能可塑性、cAMP-PKA-CREB 通路的影响，探讨阐述针刺干预海洛因复吸大鼠成瘾记忆作用的分子机制。.重要结果：本项目研究发现针刺通过抑制cAMP- PKA-CREB 通路的上调，阻止大鼠对给予海洛因相关条件的选择性，减弱海洛因诱导CPP的形成，具有潜在干预海洛因成瘾记忆的作用；针灸可干预海洛因复吸大鼠脑突触超微结构的改变和突触骨架蛋白的表达，对海洛因复吸大鼠脑组织的损伤具有一定的保护作用。.关键数据：RT-qPCR检测：与海洛因组比较，海洛因+针刺组cAMP、PKA、CREB mRNA表达下降有差异性（ p<0.05）。Western blotting检测：与海洛因组比较，海洛因+针刺组海马体中的 cAMP 和 PKA蛋白表达下降有显著差异（p<0.01）。与海洛因+针刺组比较，海洛因+美沙酮组海马体中的cAMP、PKA和CREB蛋白表达上升有显著差异（p<0.01）。 电镜观察：与模型组比较，针刺治疗后电镜下突触的超微结构有明显的修复趋势。.科学意义：药物成瘾属慢性复发性脑病，如何干预成瘾记忆的形成，减少高复吸率的发生及其作用机制研究，是一个非常重要，具有现实意义的课题。针刺干预海洛因脑损伤在防治药物成瘾研究领域中具有特色。本项研究立足于中医整体观，阐释针刺通过调控cAMP- PKA-CREB 通路干预海洛因成瘾记忆形成的的作用机制，既为针灸戒毒康复提供了科学依据，丰富了针灸理论，又促进了针灸戒毒康复的临床应用，科学意义和现实意义重大。