芯片杂交及原位RNase H切割技术指导siRNA的设计

siRNA与现有的基因治疗药物相比，具有治疗理论新颖、药效特异、作用时间长等特点，并且siRNA为内源性活性物质，安全性好。本课题拟以KDR基因为靶点，通过已经建立的专利技术，定向设计有潜在高活性的与靶mRNA互补的siRNA，研究最佳反义寡核苷酸结合位点与高活性siRNA位点之间的相关性，研究靶向KDR的siRNA对内皮细胞及肿瘤细胞的生长抑制作用，研究siRNA作用的分子信号转导途径，探讨通过干扰mRNA功能达到治疗肿瘤的目的。同时，以已知最佳反义结合位点的基因PAI-1、5'NCR HCV-Luc为模式基因，设计siRNA进行对比研究以证实我们的推测- - 反义寡核苷酸的最佳结合位点可能就是高活性siRNA的作用位点。本课题对siRNA与mRNA结合及干扰作用的分子机制研究，新型肿瘤基因治疗药物的筛选具有重要的理论价值和现实指导意义。