两种肺腺癌细胞体内外放射后残留细胞增殖迁移及干细胞变化的比较性性研究

Tumor recurrence and metastasis are the problems of lung cancer radiotherapy. It was reported that the changed bio-effects were found on some residual cells after radiotherapy and chemotherapy. But the changes were inconformity. The inherent radiosensitivity between Yunnan Xuanwei lung Cancer cell XWLC-05 and lung adenocarcinoma cell A549 was different. And it was related with PI3K/AKT activity, cell apoptosis, cell cycle distribution, DNA damage and repair. It is suggested that different radiation may take the different bio-effect on two kinds of residual lung cancer cells. In the study, we will focus on the residual cells of XWLC-05 and A549 cells after different dose and different fraction in vivo and in vitro. We will investigate the changes of cellular radiosensitivity, proliferation, metastasis，tumor stem cell rates, apoptosis, cell cycle distribution, DNA damage and repair, the activity of PI3K/AKT pathway. And we will detect the expression of related genes and proteins investigate. The study will analyze the changes and difference of bio-effects on XWLC-05 and A549 cells after different radiation and explore the related mechanism. It will bring the guidance for lung cancer therapy.

放疗后肿瘤的复发转移是肺癌放射治疗中难以解决的问题。研究发现一些肿瘤细胞经放化疗后残留细胞的生长、侵袭转移及肿瘤干细胞特性等发生改变，但变化并不一致。云南宣威肺腺癌XWLC-05和普通人肺腺癌A549细胞存在固有的放射敏感性差异，且与PI3K/AKT通路活性差异、细胞凋亡、细胞周期分布及DNA损伤与修复有关。不同照射可能会对两种残留肺癌细胞的生物学行为造成不同的影响。本项目旨在通过不同剂量X线照射后的XWLC-05和A549残存细胞及小鼠移植瘤放射敏感性、细胞增殖、迁移、肿瘤干细胞比例、细胞凋亡、周期分布、DNA损伤与修复、PI3K/AKT通路活性及相关基因、蛋白的表达变化，体内外对照研究两种肺癌细胞经不同照射后残存细胞生物学行为的改变及差异，并探讨其发生机制，以期对肺癌的放射及综合治疗带来指导。

放疗后的复发转移是肺癌放射治疗中难以解决的问题。研究发现放化疗后残留肿瘤细胞的生长、侵袭转移及肿瘤干细胞特性等会发生不同的改变。云南宣威肺腺癌XWLC-05和人肺腺癌A549细胞存在固有的放射敏感性差异，且与PI3K/AKT通路活性差异、细胞凋亡、细胞周期分布及DNA损伤与修复有关。本项目通过体内外实验对照研究两种肺癌细胞经不同剂量X线照射后残存细胞生物学行为的改变及差异。发现XWLC-05细胞放射敏感性高于A549细胞，但放射后A549残存细胞的放射敏感性增加，而XWLC-05残存细胞的放射敏感性降低；XWLC-05细胞生长增殖能力较A549细胞强，但放射后两种移植瘤之间的生长差异缩小；A549细胞迁移能力较XWLC-05细胞强，放射后细胞迁移先抑制后增强，且随着时间的延续，细胞之间的差异也在改变；放射后两种肺腺癌残存细胞的凋亡率以及G0/G1、G2/M和S期细胞比例均较前发生不同的改变；细胞中CD44+、CD133+和CD44+CD133+肿瘤干细胞比例较放射前升高，但A549细胞的升高幅度低于XWLC-05细胞；A549细胞中γ-H2AX阳性比例低于XWLC-05细胞，且残存细胞放射后γ-H2AX表达降低；放射后残存细胞中增殖、凋亡、迁移（PCNA, P53, MMP-2）和DNA损伤修复（DNA-PKcs, Ku70, Ku80）以及PI3K/AKT通路活性（AKT, p-AKT308, p-AKT473）相关的蛋白表达也发生了改变，并且随着放射后时间的延续而变化。提示云南宣威肺腺癌XWLC-05和肺腺癌A549体内外放射后残存细胞的细胞和分子生物学的改变存在差异，这种变化和差异可能与PCNA、P53、MMP-2、DNA损伤修复、肿瘤干细胞和PI3K/AKT通路活性的变化有关。本研究有助于了解肺腺癌细胞的放射生物效应和相关机制，为肺癌复发转移和放射治疗提供理论指导。