达沙替尼通过Syk通路抑制巨噬细胞破坏血小板在免疫性血小板减少症中的作用及机制研究

One of the important pathogenesis of Immune thrombocytopenia (ITP) is that anti-platelet autoantibody combines with platelets, and Fc fraction of antibody conjuncts with macrophages inducing platelet destruction in spleen. Spleen tyrosine kinase (Syk) plays an important role in Fc gamma R mediated macrophage phagocytosis. In view of the current situation above，we proposed hypothesis that using Dasatinib to block syk signaling pathway in macrophages to inhibit platelets destruction. In this project, Dasatinib will be used to act on human macrophage cell line. We will investigate this hypothesis with comprehensive methods including real- time PCR, Western blot and flow cytometry, verify inhibition of syk, plc gamma 2 gene expressions in macrophages, detect changes of platelets apoptosis, and confirm the effect of Dasatinib in vivo in ITP mouse model. We expect that Dasatinib inhibits platelets destruction via macrophages Syk signaling pathway in ITP, and could clarify the mechanism further more. Understanding the mechanisms responsible for Dasatinib in ITP will allow us to discover Dasatinib specific therapeutical effect on ITP and provide new targets for ITP.

免疫性血小板减少症（ITP）的重要发病机制之一是抗血小板自身抗体与血小板结合后，抗体Fc段与巨噬细胞结合导致血小板在脾脏中被破坏。脾酪氨酸激酶（SYK）在促进FcγR介导的巨噬细胞吞噬作用中发挥重要作用。本课题拟针对上述现状，提出利用达沙替尼阻断巨噬细胞的syk信号传导通路，从而抑制其破坏血小板的假说。本项目中我们将用达沙替尼作用于人巨噬细胞株，用real-time PCR、Western Blot、流式细胞术等方法，验证巨噬细胞syk、plcγ2基因表达受抑制情况、同时检测血小板凋亡的变化；并在ITP小鼠体内进一步验证达沙替尼的上述作用。证实达沙替尼具有通过抑制巨噬细胞的Syk通路基因表达、减少巨噬细胞破坏血小板的作用，并进一步阐明其发生机制。这一假说的成功验证将揭示达沙替尼对ITP重要的治疗意义，为ITP的治疗提供新的靶点。

免疫性血小板减少症（ITP）的重要发病机制之一是抗血小板自身抗体与血小板结合后，抗体Fc段与巨噬细胞结合导致血小板在脾脏中被破坏。脾酪氨酸激酶（SYK）在促进FcγR介导的巨噬细胞吞噬作用中发挥重要作用。本课题针对上述现状，提出利用达沙替尼阻断巨噬细胞syk信号传导通路，从而抑制其破坏血小板的假说。本项目中我们利用达沙替尼作用于人巨噬细胞株，用real-time PCR、流式细胞术等方法，验证巨噬细胞syk, plcγ2基因表达受抑制情况、同时检测血小板凋亡的变化。经过我们的研究，进一步证实了达沙替尼具有通过抑制巨噬细胞的syk通路基因表达、减少巨噬细胞破坏血小板的作用，并进一步阐明了其发生机制。这一假说的验证进一步揭示了达沙替尼对免疫性血小板减少症的重要的治疗意义，有可能在临床应用中为ITP的治疗的新靶点提供新的思路。