以改造隐性表位为基础的恶性疟原虫多期多表位重组腺病毒疫苗的构建和免疫效果评价

疟疾仍然是危害人类健康的严重传染病。研制安全、价廉和有效的疟疾疫苗是人类控制乃至根除疟疾的重要途径。由于疟原虫复杂的生活史、抗原变异和多种入侵途径，有效疫苗研制仍面临极大困难。本项目从耐突变的保守的隐性表位入手，通过修饰，在不改变表位肽和TCR结合的特异性的同时，增加"肽-MHC"的亲和性来激发针对低亲和性表位的免疫应答，并产生高活性CTL，从而突破抗原变异难关。为此，本研究拟修饰来自于恶性疟原虫子孢子期和肝期的不同抗原的隐性表位，使其获得较高免疫原性，同时辅以重要的B 细胞表位环子孢子蛋白中的NANP重复区和重要的红内期顶端膜抗原AMA-1，据此构建恶性疟原虫复合多表位重组腺病毒并进行免疫效果分析。该研究方法涉及到恶性疟原虫生活史多阶段，兼顾到体液免疫和细胞免疫，可能对研究有效的恶性疟原虫预防/治疗性疫苗提供重要的理论和实践基础。

疟疾仍然是危害人类健康的严重传染病。全球疟疾形势迫切需要采用新的疟疾防治方法以控制其流行。由于疟原虫复杂的生活史、抗原变异和多种入侵途径，有效疫苗研制仍面临极大困难。本项目从耐突变的保守的隐性表位入手，通过修饰，在不改变表位肽和TCR结合的特异性的同时，增加“肽-MHC”的亲和性来激发针对低亲和性表位的免疫应答，并产生高活性CTL，从而突破抗原变异难关。本项目应用生物信息学软件，筛选疟原虫红细胞外期抗原中的低MHC 亲和力的隐性表位，对其进行改造，依据这些修饰后的隐性表位联合疟原虫红内期顶端膜抗原AMA-1构建以复制缺陷型腺病毒为载体的复合多其多表位预防/治疗性疫苗，并免疫小鼠进行免疫效果分析。结果显示：成功预测出和实验检测了修饰改造的疟原虫红细胞外期低亲和力表位，成功构建了联合红内期AMA-1抗原和改造后表位的基因序列的重组腺病毒疫苗载体。重组腺病毒疫苗载体免疫小鼠后有效的诱导了细胞和体液免疫应答，首先获得了较高效价抗体，其次能够有效刺激淋巴细胞增殖，极大的诱导细胞因子产生，也具有较好的CTL杀伤活性。该疫苗涉及到恶性疟原虫生活史多阶段，兼顾到体液免疫和细胞免疫，可能对研究有效的恶性疟原虫预防/治疗性疫苗提供重要的理论和实践基础。