大益普洱茶渥堆过程中微生物群落组成与消长规律研究

本项目以勐海茶业有限责任公司大益牌普洱茶渥堆过程中的微生物为研究对象，拟解决参与普洱茶发酵的微生物是什么以及如何实现其可培养的科学问题。通过采集渥堆样品，应用高通量的454测序技术和生物信息学技术，系统研究普洱茶渥堆过程中的微生物群落组成、物种多样性、主要类群及其消长规律；同时，以渥堆过程中的环境因子参数为参照，摸索出适合渥堆过程中微生物的分离条件，以渥堆过程中的微生物营养需求和代谢类型设计分离培养基，筛选出和普洱茶渥堆有关联的微生物分离方法；以免培养实验结果为指导，结合纯培养技术，实现渥堆不同阶段主要微生物的可培养；通过扫描电镜的形态观察跟踪和与熟茶品质相关的功效组分检测跟踪，比较渥堆不同样品和可培养微生物的发酵物的形态及功效组分的相关性，探索可培养微生物与普洱茶（熟茶）功效组分的关系，为今后普洱茶生产工艺改进提供理论指导和菌种资源保障。

完成大益集团勐海茶业有限责任公司的8个渥堆共计360个样品的现场采集，并在其技术中心实验室完成样品DNA的原位提取，保证了研究对象材料的真实性，应用高通量测序技术及生物信息学大数据分析，精确绘制了普洱茶渥堆过程中微生物群落组成与资源分布全过程资源图，揭示了普洱茶渥堆过程中微生物群落组成与消长规律。应用该规律，建立了选择性的、高效的普洱茶渥堆中微生物分离方法，并成功分离并初步鉴定了105种微生物。对其中的主要共性微生物资源在发酵及其代谢产物化学水平上做了初步探索性研究。研究成果支撑普洱茶龙头企业“大益集团有限责任公司”成立了企业自筹资金建立的“大益集团微生物研发中心”，并在此基础上申请云南省发展与改革委员会的“云南省普洱茶发酵工程研究中心”，并获得授牌。发表SCI论文3篇，投稿2篇，完成7件专利受理。后续SCI论文，在知识产权保护后，将加快投稿、发表。