基于TRAb胞内信号传导通路探讨滋阴潜阳化痰散结法治疗Graves病的机制研究

促甲状腺素受体抗体（TRAb）是Graves病（GD）的发病关键，其中，刺激性抗体（TSAb）起主导性作用，新近TRAb胞内信号传导通路已得到初步阐明。GD占甲亢的85%，我院既往近30年临床和实验研究发现阴虚阳亢证占所有甲亢中医证候的73.4%，并以滋阴潜阳化痰散结法制备甲亢宁胶囊，疗效确切。本项目在既往研究成果的基础上根据中医整体观念、阴阳平衡理论，推测滋阴潜阳化痰散结法具有抑制含量过多的TRAb胞内信号通路传导，以起到调控甲状腺素分泌、改善甲状腺肿大的作用。课题采用患者的TRAb刺激FRTL甲状腺细胞建立细胞模型，运用表达TSHR-A亚单位的腺病毒免疫BALB/c雌性小鼠建立动物模型，进行甲亢宁干预，观察TRAb胞内信号传导关键因子及甲状腺素分泌、细胞增长等变化，并与他巴唑组并行检测，探究中医药在该通路中的优势作用，为临床使用该法治疗GD提供科学依据，为研究中医药治疗GD拓宽思路。

格雷夫斯病（Graves' disease，GD）是在环境因素与遗传因素相互作用下，机体免疫系统对自身成分发生免疫应答而导致的疾病状态。目前对GD的发病机制尚未完全阐明，但已经明确TSH 受体抗体（thyroid stimulating receptor antibody，TRAb）是Graves病的重要病因。目前治疗Graves病的方法包括药物治疗、手术治疗和放射碘治疗，并没有特异性的针对Graves病的病因，而调节TRAb信号传导通路可能是最可取的方法。中国中医科学院广安门医院内分泌科林兰教授自1978年开始从事Graves病的研究，制备了具有滋阴潜阳、化痰散结功效中药制剂甲亢宁胶囊。经过30多年的临床观察证明，甲亢宁胶囊在治疗Graves病上疗效确切。本课题在此基础上对甲亢宁胶囊的作用机制进行初步研究。.课题组依托国家自然科学基金资助，通过细胞实验检测了甲亢宁胶囊作用的时效及量效关系， FRTL-5细胞增殖与凋亡，细胞周期和TRAb信号传导通路相关蛋白及凋亡通路蛋白的表达；通过动物实验检测了小鼠血清T4、T3、TSH、TRAb浓度，甲状腺组织HE染色和TRAb信号传导通路相关蛋白及凋亡通路蛋白的表达，初步探索了甲亢宁胶囊对TRAb胞内信号传导通路的作用，对甲状腺细胞增殖与凋亡的影响，以及对TRAb胞内信号传导通路与增殖及凋亡通路的相互作用。.研究结果表明：甲亢宁胶囊能下调TRAb信号传导通路关键蛋白（Akt、mTOR等）的表达水平，一方面调节甲状腺激素的合成与分泌，有效的减轻甲状腺功能亢进状态；另一方面抑制甲状腺细胞增殖，促进甲状腺细胞凋亡，有效的改善甲状腺肿大。此外甲亢宁胶囊还能调节机体免疫功能，降低致病性抗体TRAb，这可能会有助于减少Graves病的复发。 .本项研究从TRAb胞内信号传导通路部分探讨了滋阴潜阳化痰散结法治疗Graves病的分子机制，初步阐释了滋阴潜阳化痰散结法治疗Graves病的科学内涵。研究结果为传承和挖掘名老中医经验及中医药防治Graves病提供依据。