芒果甙作用于KSHV复制周期的分子机制及对类KS裸鼠移植瘤的影响

AIDS患者容易发生卡波济肉瘤（KS），称为AIDS-KS。卡波济相关疱疹病毒（KSHV）复制周期的调节在KS的发生和发展中起关键作用，病毒复制进入裂解期可产生大量病毒，有利于病毒在机体内扩散。而扩散到周围组织的病毒一旦发生潜伏感染，则可表达潜伏周期蛋白，导致宿主细胞发生转化。因此，使用药物调节KSHV的复制周期，可作为治疗KS的思路。芒果甙(mangiferin)具有抗脂质过氧化、免疫调节、抗糖尿病、抗肿瘤、抗病毒等药理作用。本项目拟用实时荧光定量PCR、免疫印迹等实验技术，研究芒果甙对体腔淋巴瘤细胞系BCBL-1细胞中的KSHV复制周期的作用，并采用基因芯片、免疫印迹、RNA干涉等实验技术探索芒果甙的分子作用机制；同时利用类KS裸鼠移植瘤抑瘤实验观察芒果甙对类KS的作用。综合以上研究，探讨芒果甙用于AIDS-KS治疗的可能性。

AIDS患者容易发生卡波济肉瘤（KS），称为AIDS-KS。卡波济相关疱疹病毒（KSHV）复制周期的调节在KS的发生和发展中起关键作用，病毒复制进入裂解期可产生大量病毒，有利于病毒在机体内扩散。而扩散到周围组织的病毒一旦发生潜伏感染，则可表达潜伏周期蛋白，导致宿主细胞发生转化。因此，使用药物调节KSHV的复制周期，可作为治疗KS的思路。芒果甙(mangiferin)具有抗脂质过氧化、免疫调节、抗糖尿病、抗肿瘤、抗病毒等药理作用。本项目研究计划通过流式细胞术、实时荧光定量PCR探讨芒果苷对KSHV病毒复制周期影响和对KSHV潜伏感染的体腔淋巴瘤来源的BCBL-1细胞的作用。并进一步采用基因芯片、免疫印迹等实验技术研究芒果苷发挥作用的分子机制；同时利用裸鼠移植瘤抑瘤实验探讨芒果苷对裸鼠移植瘤的作用。项目组通过MTT实验、台盼蓝染色法、流式细胞检测技术检测芒果苷对KSHV感染的BCBL-1细胞增殖、凋亡的影响。发现芒果苷可抑制BCBL-1细胞增殖。而同时用流式细胞仪检测芒果苷作用后的BCBL-1细胞，显示600μmol/L的芒果苷作用48h可使诱导BCBL-1细胞发生凋亡。利用实时荧光定量PCR检测芒果苷对KSHV感染细胞系BCBL-1中KSHV复制周期的作用，结果显示芒果苷导致KSHV复制周期紊乱。利用基因芯片技术寻找参与芒果甙调节KSHV复制周期的细胞信号转导分子，探索芒果甙调节KSHV复制周期的信号机制，结果显示芒果苷诱导的细胞的凋亡通路在芒果苷调控KSHV复制周期中起重要作用。此外，本项目组制备了KSHV ORF65抗血清，检测项目组构建的重组HIV-1 Tat分泌型载体的分泌表达和表达蛋白的活性。此外，项目组开展的结核杆菌基因多态性研究，为将来探索KSHV致病机制相关的基因多态性研究提供了一个新的思路。