亲环素B抑制内质网应激缓减肾小管上皮细胞损伤的作用研究

The renal tubular epithelial cell injury has become the major pathological pathway of renal interstitial fibrosis and end stage renal disease. However, the underlying mechanism for tubular epithelial cell injury has not been fully understood. In our previous study, we found that CHOP-mediated endoplasmic reticulum stress contributed to tubular epithelial cell apoptosis, we also found endoplasmic reticulum stress played a key role in the development of renal injury in vivo. Altogether, these observations suggested that endoplasmic reticulum stress induced apoptosis may be one of the important pathways of renal tubular epithelial cell injury. Cyclophilin B is an endoplasmic reticulum-localized prolyl isomerase and plays the role of protein translation. In this study, by using molecular cloning methods and constructing Cyclophilin B transgenic mouse, we observed whether Cyclophilin B had an impact on endoplasmic reticulum stress and tubular epithelial cell injury in vitro and in vivo. The object of our study not only elucidated the mechanism of renal tubular epithelial cell injury, but also provided new targets and ideas for the treatment of chronic kidney disease.

肾小管上皮细胞损伤是肾间质纤维化及终末期肾脏病的主要病理学基础，但目前肾小管上皮细胞损伤的具体机制尚不明确。我们前期研究发现：在细胞水平内质网应激相关蛋白CHOP介导的凋亡途径是肾小管上皮细胞损伤的潜在机制，体内研究同样证实内质网应激参与了肾损伤的发病机理，提示内质网应激诱导的细胞凋亡可能是肾小管上皮细胞损伤的重要通路之一。亲环素 B作为一种伴侣分子定位于内质网腔内，其能够通过肽脯氨酰顺反异构酶活性加速内质网腔内蛋白质的折叠。本研究拟通过分子克隆技术，构建亲环素 B转基因小鼠，分别在体外和体内水平观察亲环素 B对内质网应激及肾小管上皮细胞损伤的影响。本课题有助于阐明肾小管上皮细胞损伤的潜在机制，同时也为临床治疗慢性肾脏病提供新的靶点和理论依据。

肾小管上皮细胞损伤是肾间质纤维化及终末期肾脏病的主要病理学基础，但目前肾小管上皮细胞损伤的机制尚不清楚。我们前期研究发现：在细胞水平内质网应激相关蛋白CHOP介导的凋亡途径是肾小管上皮细胞损伤的潜在机制，体内研究同样证实内质网应激参与了肾损伤的发病机理，提示内质网应激诱导的细胞凋亡可能是肾小管上皮细胞损伤的重要通路之一。亲环素 B作为一种伴侣分子定位于内质网腔内，其能够通过肽脯氨酰顺反异构酶活性加速内质网腔内蛋白质的折叠。本研究拟通过分子克隆技术，构建亲环素 B转基因小鼠，分别在体外和体内水平观察亲环素 B对内质网应激及肾小管上皮细胞损伤的影响。我们体外研究发现：醛固酮通过盐皮质激素受体方式显著增加肾小管上皮细胞凋亡、亲环素 B表达增高；同时醛固酮能够明显诱导肾小管上皮细胞内质网应激、氧化应激及线粒体功能损伤，过表达亲环素 B能够显著抑制内质网应激凋亡通路、改善肾小管上皮细胞损伤；亲环素 B基因干扰能够直接激活内质网应激及凋亡相关通路，导致肾小管上皮细胞凋亡显著增高；体内研究发现：醛固酮微泵灌注能够明显诱导小鼠肾小管上皮细胞刷状缘消失、空泡变性、肾小管管腔扩大及肾小管上皮细胞凋亡，小鼠尿蛋白/肌酐、肾重比及血压明显增高，同时内质网应激及凋亡相关蛋白、氧化应激显著增加；通过成功构建亲环素 B过表达转基因小鼠显示，亲环素 B过表达小鼠显著抑制醛固酮诱导肾损伤、氧化应激和内质网应激相关凋亡通路。本项目通过体外及体内研究表明：亲环素 B能够通过肽脯氨酰顺反异构酶活性加速内质网腔内蛋白质的折叠，缓减醛固酮诱导肾小管上皮细胞氧化应激、内质网应激及线粒体功能损伤，本课题提示亲环素 B可能为临床治疗慢性肾脏病提供新的靶点和理论依据。