高通量测序分析H7N9抗体谱的研究

In February 2013, an outbreak caused by the avian-originated influenza A virus H7N9 subtype was reported in eastern China. Patients presented with fever, cough, sputum production, and shortness of breath, and severe cases were characterized by rapidly progressive pneumonia, acute respiratory distress syndrome (ARDS), and even death. A total of 454 H7N9 cases resulting in at least 171 deaths were reported by September 2014.The emergence of the H7N9 influenza A virus subtype caused a significant global health concern and a severe threat to public health. After the outbreak caused by the H7N9, we generated a antibody phage library derived from patients who recovered from H7N9 infections. We screened the antibody phage library and obtained a large number of monoclonal antibodies (MAbs) targeting different viral antigens。In this study program, we will get the antibody repertoires among the patients infected with H7N9 by high-throughput sequencing and comparing with the antibody sequence specific against H7N9 we have generated early. We will analysis of the antibody responses against H7N9 infection and get higher neutralizing activity antibody.

自2013年2月以来，中国东部地区爆发了由H7N9引起的禽流感。患者一般表现为发热，咳嗽，少痰，呼吸急促。重症患者病情发展迅速，表现为重症肺炎，可快速发展出现急性呼吸窘迫综合征直至死亡。截止至2014年9月，共报道454人患病，171人死亡。H7N9引起了全球的关注并严重威胁着公共卫生安全。自H7N9禽流感爆发后，我们构建了人源抗H7N9抗体库，通过高通量的筛选，获得了大量特异性针对H7N9的抗体序列。本研究计划中，我们将先通过高通量测序获得人体感染H7N9后产生的抗体谱，然后结合前期我们已经获得的特异性针对H7N9的抗体序列，分析H7N9的抗体反应规律以及获得更高活性的中和抗体。

自2013年2月以来，中国东部地区爆发了由H7N9引起的禽流感。患者一般表现为发热，咳嗽，少痰，呼吸急促。重症患者病情发展迅速，表现为重症肺炎，可快速发展出现急性呼吸窘迫综合征直至死亡。截止至2014年9月，共报道454人患病，171人死亡。H7N9引起了全球的关注并严重威胁着公共卫生安全。自H7N9禽流感爆发后，我们构建了人源抗H7N9抗体库，通过高通量的筛选，获得了大量特异性针对H7N9的抗体序列。在本研究中，我们首先采集了7名成人H7N9患者恢复期的外周血，通过高通量测序获得人体感染H7N9后产生的抗体谱，获得了八十多万条序列数。对获得的每一条独特的抗体序列进行分析，包括V-D-J结构，家族的谱系，每种谱系的丰度，并在不同的感染H7N9的人群中比较这些数据的异同。我们发现这七人的序列数均在十多万左右，而重链的VH1-VH7的7个家族都有序列的分布，其中VH3和VH5的序列尤其多。同时我们结合之前获得的H7N9特异性抗体序列，分析H7N9特异性抗体谱，发现我们获得的中和抗体的序列在病人中也均有分布，显示了在不同人群中中和抗体具有趋同性质。