CD11c阳性CD8 T及 B细胞维持小鼠器官移植长期耐受机理

器官移植是现今治疗器官终末期疾病的有效手段。强效免疫抑制药物使移植物存活率明显提高的同时，其各种毒副作用却抑制了患者的长期存活，因此诱导、维持、和预测移植耐受是当前移植领域的重点研究方向。移植耐受诱导在动物模型中已能较易达到，但仍不能客观地检测耐受状态的存在；耐受长期维持的免疫学机理仍未阐明。在临床肝和肾移植研究中，γδ T细胞和B细胞相关蛋白被发现和术后耐受相关，但这些检测仍不能用于前瞻性预测中。在小鼠心脏移植模型中，我们首次发现CD11c在外周血、脾脏、淋巴结中CD8 T细胞及脾脏B细胞表面的高表达和移植物的长期存活密切相关；移植物被排斥后CD11c明显下降。本项目将进一步鉴定CD11c阳性CD8 T及B细胞的表型特性，明确该两群细胞的免疫学功能，阐明移植物长期耐受的免疫学机理，为长期耐受的维持方法提供理论基础，为耐受在动物模型以至于今后的临床移植检测提供一灵敏、简便及客观的诊断依据。

背景和意义：临床器官移植挽救、延长了许多器官终末期患者的生命。尤其是近年来新强效免疫抑制药物的运用使移植物的5年存活率有了明显的提高。然而免疫抑制药物的各种毒副作用却抑制了患者的长期存活。因此诱导、维持、和预测移植耐受是当前移植领域的重点研究方向。能够诱导、维持、及精确地预测移植耐受状态不但将使患者免受免疫抑制药的毒副作用，而且将免除患者庞大的经济负担。移植耐受状态的长期性、稳固性、和可预测性是临床移植耐受的关键和前体条件。本项目组证明了小鼠心脏移植模型中移植耐受的长期性和稳固性；首次发现在小鼠心脏移植模型中CD11c在外周血、脾脏、淋巴结中CD8+ T细胞及脾脏B细胞表面的高表达和移植物的长期存活密切相关；移植物被排斥后CD11c表达明显下降。本项目着重研究了CD11c+CD8+ B及CD11c+ T细胞的表型特性，明确该两群细胞的免疫学功能。研究成果具有潜在的应用价值，将为提出长期移植耐受维持的可行性提供坚实的科学基础；为寻找灵敏、简便及客观的临床移植耐受相关检测分子提供充分的科学依据。.研究内容：本项目采用小鼠同种异体主要组织相容性复合体全错配心脏移植（BALB/c (H-2d)→C57BL/6 (H-2b)）为模型。采用anti-CD154mAb和供体特异脾细胞输注诱导耐受能使腹腔异位心脏移植物长期存活。在此模型基础上研究移植物长期耐受状态的稳定性和可能的耐受标志物及其维持耐受的机理。研究包括三方面:长期耐受状态下受体的耐受状态是否真正稳固；长期耐受状态下受体内有无和耐受状态相关联的标志物；耐受状态相关联标志物在耐受维持过程中可能的机理。 .研究结果：本研究发现（1）小鼠同种异体心脏移植耐受模型中长期耐受状态可稳固维持超过200天以上；通过使用李斯特菌感染甚至证明此长期耐受状态虽可被暂时打断，仍可自然恢复，从而证明了移植物长期耐受状态的稳固性。（2）长期耐受状态下可在耐受个体脾脏中发现CD11c+ B细胞群和耐受状态相关，该细胞群呈现未成熟B细胞之特征并高表达负性共同刺激分子及低表达正性共同刺激分子；长期耐受状态下可在耐受个体外周血、脾脏、淋巴结中发现CD11c+ CD8+ T细胞群和耐受状态相关。从而证明了在长期耐受状态下确实存在和耐受状态相关的标志物。（3）耐受个体脾脏中CD11c+ B细胞群似乎和耐受状态维持无关。