基于药动学和药效学药物相互作用的附子甘草多组分配伍减毒强心机制研究

Traditional Chinese medicine is a complex multi component system. At present, Chinese medicine pharmacokinetic (PK) paraphrase the research methods of western medicine Single ingredient PK, and most of prescription compatibility study stay in the demolition party, efficacy, chemical composition and other aspects, which is difficult to reflect the chinese medicine multi-component interactions (DI) and PK characteristics. Breakthrough the traditional PK research model of Traditional Chinese medicine. Based on DI, prescription seven emotions. By the principle of PK and PD. Introduction of LR, ANN and so on mathematical methods. Focus from the monkshood and licorice multi-component drug interaction between the pharmacokinetics of the pharmacological effects, combined with drug absorption and biological translational research. Making rat heart failure, Caco-2 cells, Fa2N-4 cell model. Monkshood and licorice component series compatibility as an object, to measure aconitine, glycyrrhetinic acid and other ingredients in animal blood in different time with HPLC、LC/MS, synchronous dynamic test effectiveness indexes in rats such as cardiac function, hemodynamics and myocardial oxidation, inflammation, premature beat, and build the multicomponent PK and PD, PK-PD models. Combined with previous research, and gradually establish reflect the PK,PD characteristics of Chinese traditional medicine multi-component, and the new methods of herbal research. Realization of monkshood and licorice " attenuated toxicity and strong heart" mechanism from DI, PK angles, compatibility principles and to seek the target of the best formula, which has important scientific significance in prescriptions for PK and compatibility research.

中药是多组分复杂体系。目前,中药药代（PK）多套用西药单成分PK研究方法；方剂配伍研究多停留在拆方、药效、化学成分等层面,难以反映中药多组分相互作用（DDI）、PK特征。 . 突破中药PK研究的传统模式，以DDI、方剂"七情"为指导，借助PK、PD原理和LR、ANN数理方法,重点从附甘多组分的药代性、药理效应性相互作用角度,结合药物吸收、生物转化研究。制作大鼠心衰、Caco-2细胞、Fa2N-4细胞模型,以附甘组分系列配伍方为对象，HPLC、LC-MS测定、表征不同时相动物血液乌头碱、甘草次酸等；同步动态检测大鼠心功能、血流动力学、心肌氧化、炎症、室性早搏药理指标；构建多组分PK、PD、PK-PD模型。 . 结合前期研究，逐步建立反映中药多组分PK、PD特征、方剂配伍研究新方法；实现从DDI、PK等角度探讨附甘"减毒强心"机制、配伍原理和寻求最佳组方的目标。对方剂PK、配伍规律研究有重要科学价值。

目前中医方剂或中药PK研究多按西药PK方法进行单个成分分析，难以反映中医方剂或中药复方多组分及其相互作用等特征。本项目突破中药PK研究的传统模式，以DDI、方剂"七情"为指导，借助PK、PD原理和LR、ANN数理方法,重点从附甘多组分的药代性、药理效应性相互作用角度,结合药物吸收、生物转化研究。现已按研究计划，经四年研究完成了研究任务，取得了较好的成果。.主要内容和重要结果：研究了甘草中黄酮类成分的最佳提取工艺；研究了不同配伍比例附子和甘草有效成分对H9c2心肌细胞缺氧缺糖损伤的保护作用及其机制；探讨了甘草次酸、甘草苷配伍次乌头碱对慢性心衰大鼠抗心衰作用及可能机制；研究了附子甘草有效成分对慢性心力衰竭大鼠和急性心力衰竭大鼠保护治疗作用；采取MTT法，根据细胞代谢活动与活细胞数直接成比例的原理，测定了各组不同浓度活性物质对传代心肌细胞存活率的影响；探讨了附子甘草主要成分配伍对乌头碱致大鼠传代心肌细胞损伤的保护作用及机理；研究了附子甘草活性物质配伍对心肌细胞SDH、Na+-K+ ATP酶、Ca2+-Mg2+ ATP酶活性的影响；附子甘草活性物质配伍免疫印迹法分析对心肌细胞钙调控蛋白表达的影响；根据细胞代谢活动与存活细胞相关的原理，分别测定了次乌头碱、甘草次酸、地高辛等本实验所用的药物对传代心肌细胞存活率的影响情况；进行了次乌头碱与甘草次酸最佳配伍比例对缺氧缺糖模型下心肌细胞凋亡的作用及机制研究；建立大鼠慢性心衰模型，进行了HA配伍GA对慢性心衰大鼠的抗心衰的相关作用及机制研究。结合前期研究，逐步建立反映中药多组分PK、PD特征、方剂配伍研究新方法；实现从DDI、PK等角度探讨附甘"减毒强心"机制、配伍原理和寻求最佳组方的目标，对方剂PK、配伍规律研究有重要科学价值。.正式发表论文11篇，其中SCI收录5篇，已录用待见刊1篇；出版专著1部；科学技术成果登记1项。项目负责人入选国家百千万人才工程，培养研究生12名；参加国内外学术交流50余人次。