TRPA1和TRPM8在牙髓冷敏感中的作用机制研究

牙髓冷敏感在口腔临床治疗中十分常见，被视为"口腔疾病中的感冒"。但目前牙髓冷敏感的发病机制还不清楚。瞬时受体电位通道(TRP)家族中冷敏感受体TRPM8 和TRPA1的发现为牙髓冷敏感研究提供了新的角度。在临床上我们发现，漂白剂中的过氧化氢所引起的牙髓冷敏感症状与TRPM8介导凉刺激、TRPA1介导冷刺激痛的特征一致。该现象表明牙髓中可能存在由TRPM8 和TRPA1介导的冷敏感传导通路，国内外相关研究较少。本课题根据国内外最新研究和前期实验结果，提出了以冷敏感受体为主导的传导机制。拟通过RealtimePCR、Western blot、免疫组化、钙离子成像和膜片钳等生物学方法检测在不同冷刺激下TRPM8和TRPA1的表达、分布和活性变化，并尝试将体外检测结果与临床症状相关联。并期望能应用所探明的机制筛选出能够应用于临床上的脱敏剂，为彻底克服牙髓冷敏感提供理论支持。

前言: 牙本质敏感的机制研究一直以来争议较多。流体动力学说是最为广泛接受的假说。冷刺激是引起牙本质敏感最主要刺激之一。而冷刺激是直接被感知，还是流体动力学说被感知，仍然存在争议。此外，在牙本质小管内，同时存在两种结构，成牙本质细胞突起和牙髓神经末梢。这两种细胞均有研究证明TRP通道的存在，即均有感知刺激的功能。对于哪一个在牙本质敏感中发挥着主要的感受刺激的功能这一问题，鲜有文献报道。 .方法与材料： 将4weekSD大鼠随机分为三组，空白组，漂白组，薄荷醇组。通过使牙本质暴露，封存双氧水，薄荷醇，构建牙本质敏感动物模型，观察行为学变化。提取原代牙髓细胞和三叉神经细胞，通过western blot技术，single-cell PCR技术，免疫荧光技术检测牙本质敏感情况下TRPA1通道和TRPM8通道的表达和功能情况变化。.结果： 在进行六天封药刺激后，检测到敏感组动物的进水量，体重，进食量与漂白组动物相比，都发生了明显的改变。（P>0.05）通过半定量PCR、免疫荧光技术发现敏感组动物的TRPA1通道和TRPM8通道的表达量明显上调。.结论： 综上所诉，我们认为牙本质冷敏感刺激的感知可以直接由冷敏感通道TRPA1通道和TRPM8通道的表达感知。并且牙本质敏感导致的冷敏感性增加与TRPA1通道和TRPM8通道的表达上调有关。