慢性缺血性抑郁神经血管单元稳态变化及中药干预

血管性抑郁是危害严重的晚发性血管障碍性抑郁症，主要由慢性缺血性脑白质损害（WML）及应激等原因引起。本课题在继承和深入挖掘名老中医经验及前期研究基础上提出了血管性抑郁症主要病机元气亏虚、气血郁滞的可能机制是慢性缺血及应激引起神经血管单元失稳态及重构障碍、影响5-HT等情感神经递质水平及功能表达所致，益气开郁法是有效治疗途径的假说。通过建立慢性缺血脑白质损伤叠加慢性应激抑郁大鼠模型，采用认知行为、多谱勒超声、酶联免疫、液相芯片、高效液相-电化学、透射电镜、RT-PCR等技术，通过观察神经血管单元稳态变化及BDNF、TrkB、GFAP、VEGF受体表达及其信号转导、5-HT等情感神经递质水平及表达，从整体、细胞、分子水平研究血管性抑郁成因元气亏虚、气血郁滞的分子机制与益气开郁法的脑保护作用及神经血管单元重塑机制，揭示其病机治法的科学内涵，为中医防治血管性抑郁拓展新思路和提供有效治疗方药。

目的：血管性抑郁主要由慢性缺血性脑白质损害（WML）及应激等原因引起的危害严重的晚发性血管障碍性抑郁症。本课题在继承和深入挖掘名老中医经验的基础上，结合前期研究，根据血管性抑郁症的临床特征，提出了血管性抑郁症主要病机是元气亏虚、气血郁滞，可能机制是慢性缺血及应激引起神经血管单元失稳态及重构障碍、影响5-HT等情感神经递质水平及功能表达所致，益气开郁法是有效治疗途径的假说。方法：使用LBCCA建立慢性脑缺血模型，CUMS叠加孤养法建立抑郁模型，两种方法合理组合形成血管性抑郁模型，通过行为学以及脑血流量的测定以评估模型。模型成功后，使用阳性对照药和不同剂量的开心解郁方进行干预，采用认知行为、多谱勒超声、酶联免疫、液相芯片、高效液相- 电化学、透射电镜、RT-PCR技术，探索血管性抑郁的发病机制以及中药的作用。结果：开心解郁方可以明显改善大鼠的抑郁状态，增加脑血流量。光镜及电镜观察下，模型组大鼠海马组织出现病理性损伤，使用开心解郁方干预后有所改善。测定大鼠血清中细胞因子表达后发现，模型组大鼠血清中IL-1β、IL-2、IL-6、TNF-α 和 ET-1的表达均显著升高，NO表达显著降低，开心解郁方可调节其异常表达。海马中GFAP/BDNF、BDNF/TrkB蛋白和基因表达结果，模型组染色阳性细胞面积和强度均显著减小，细胞数目减少，治疗组阳性细胞面积、强度和数目均有所恢复，药物治疗组GFAP/BDNF mRNA的相对表达水平均显著高于模型组；开心解郁方还可以上调海马区BDNF/TrkB表达水平。模型组大鼠皮层t-PA表达水平降低， PAI-1、MMP-2表达增高，t-PA/PAI-1平衡被破坏，MMP-9各组间无显著性差异；开心解郁方可改善其异常表达。大鼠皮层VEGF/Flk-1和5-HT1A/2AR的蛋白和mRNA表达结果显示，模型组大鼠VEGF及其受体Flk-1、5-HT1AR表达水平显著降低，而5-HT2AR表达水平显著增高；开心解郁方可以改善这种异常表达。结论：LBCCA叠加CUMS结合孤养的血管性抑郁造模方法是成功的，开心解郁方可以改善该模型大鼠出现的行为学抑郁状态表现、脑血流量下降、脑海马组织病理损伤、细胞因子的异常表达、单胺类受体异常表达以及脑血管单元的失衡状态。