从防治肝肾纤维化作用阐释白首乌“肝肾同治”的科学内涵

Similar characteristics and mechanisms between hepatic fibrosis and kidney fibrosis were proved by modern studies and TLR4-MyD88-NF-κB signal pathway was closely related to both of them, which provided a theoretical basis for clinical treatment. Our previous studies found that the total glycosides of baishouwu showed significant effects on hepatic and kidney fibrosis, but the correlation between them was largely unknown. According to our previous studies, the project would reveal the action character and biological entity of baishouwu on preventing hepatic and kidney fibrosis in the C57BL/10.TLR4-/- mice and in vitro by hepatic stellate cells and renal tubular epithelial cells. And the molecule network mechanism of baishouwu targeting on liver and kidney by TLR4-MyD88-NF-κB pathway would be clarified. Combined the theory of Chinese medicine treatment of “homogeny of liver and kidney” with modern pathogenesis, the studies woud provide scientific evidence for development and clinical application of bashouwu, and a new idea and method for studying on treating complex and chronic disease with Chinese medicine would be set up.

现代研究证实肝纤维化与肾纤维化具有相似的病理特点及发病机制，炎症通路TLR4-MyD88-NF-κB与二者均密切相关，这为临床“异病同治”提供了理论依据。中医药在治疗多脏器纤维化方面疗效显著，项目前期研究证实白首乌C21甾苷对肝纤维化与肾纤维化均有显著防治作用，但对肝肾两脏器纤维化的网络调控相关性尚未探明。本项目拟在前期研究基础上，利用TLR4基因敲除小鼠肝纤维化和肾纤维化并存模型以及体外肝星状细胞和肾小管上皮细胞共培养模式，阐明白首乌C21甾苷类组分保护肝肾功能和防治肝肾纤维化的功效特点及生物学本质，并基于TLR4-MyD88-NF-κB信号通路深度解析其作用靶点和分子机制。本项目将中医“肝肾同源”、“肝肾同治”理论与现代发病机制相融合，全面深入揭示白首乌补益肝肾传统功效的科学内涵，为白首乌的临床用药提供科学依据，为中药全面平衡调节慢性复杂疾病的分子机制研究提供新的思路和方法。

本项目通过对白首乌中主要活性组分C21甾苷类组分防治肝肾纤维化作用进行系统研究，基于“肝肾同源”理论阐明其保护肝肾功能、防治肝肾纤维化的功效特点及其内在规律，通过对TLR4-MyD88-NF-κB相关信号通路的深入研究探明其分子调控机制。本研究分别采用化学毒性诱导或手术方法等不同造模手段诱导多种肝肾纤维化动物模型，比较不同模型的差异，为肝肾相关疾病模型的建立和优化提供依据，也为进一步研究药物作用机制提供参考。体内研究采用复合因素诱导大鼠或C57BL/10.TLR4-/-小鼠肝脏与肾脏纤维化并存模型，考察白首乌C21甾苷类组分的干预作用，并探查炎症通路TLR4-MyD88-NF-κB在肝肾纤维化形成中的作用以及白首乌C21甾苷类组分防治肝肾纤维化的作用靶点及分子机制。体外细胞实验基于TLR4-MyD88-NF-κB信号通路研究白首乌C21甾苷类组分对炎症刺激下肝星状细胞活化及肾小管上皮细胞转分化的作用，同时考察活化的肝星状细胞对肾小管上皮细胞转分化的影响。本项目研究发现，TLR4-MyD88-NF-κB信号通路在肝肾纤维化的发病过程中起重要作用，白首乌C21甾苷类组分体内外均有明显的防治肝肾纤维化作用，其机制与下调TLR4、MyD88、TRAF6、p-ERK、p-p38、TGF-β1及α-SMA的表达、抑制NF-κB活化及抑制炎症因子TNF-α、IL-2和IL-6的释放有关。体外研究发现，活化的肝星状细胞能促进肾上管上皮细胞的转分化，提示肝肾两脏器疾病的发生存在内在关联及相互影响，从而为白首乌肝肾同治理论提供实验依据。进一步的网络药理学研究结果表明，IL-1β/MyD88炎症信号通路在白首乌C21甾苷类组分抗纤维化作用中发挥了重要作用，这也揭示了肝肾纤维化的发病处于错综复杂的网络调控之中，而白首乌C21甾苷类组分通过多环节多靶点发挥防治肝肾纤维化作用。