复肝丸调控肾素-血管紧张素系统再平衡抑制肝纤维化的作用机制研究

The renin-angiotensin system (RAS) imbalance plays an extremely important role in the pathogenesis of liver fibrosis, and the rebalance of the axis of ACE-Ang II-AT1 and ACE2-Ang（1-7）-Mas in RAS has now becomed a new therapeutic target for hepatic fibrosis. Fugan pill has excellent effect in preventing and treating chronic liver diseases, and we screened out it has effective prescription in anti-liver fibrosis at the support of major new drug discovery. Fugan pill could inhibit angiotensin II (AngII) type 1 receptor (AT1), upregulate Ang（1-7）receptor Mas in the rat liver fibrosis model, suggesting that the mechanism of fugan pill on liver fibrosis may be related to the regulation of RAS. Therefore, we supposed that the regulation of RAS is an important molecular pharmacological mechanism of fugan pills in the treatment of liver fibrosis. In this study, we intend to investigate the anti-liver fibrosis effect and the regulation of RAS of Fugan pill with an Ang II infusion-induced rat liver fibrosis model. We would also investigate the mechanisms of Fugan pill in the prevention and treatment of liver fibrosis in Ang II-activated hepatic stellate cells. Our study may provide a scientific basis for the development of new Chinese drugs in the prevention and treatment of liver fibrosis.

肾素-血管紧张素系统（RAS）失衡在肝纤维化发生中有极其重要的作用，而调控RAS中ACE-Ang II-AT1轴与ACE2-Ang（1-7）-Mas轴之间的再平衡成为抗肝纤维化的新靶点。复肝丸是临床经验方，前期研究表明具有显著抗肝纤维化的作用，且能抑制血管紧张素II（AngII）1型受体（AT1），上调Ang（1-7）受体Mas表达。因此我们提出“调控RAS再平衡是复肝丸抗肝纤维化的重要作用机制”的假说。为验证这一假说，我们拟采用AngII持续灌注诱导大鼠肝纤维化模型，以AT1拮抗剂（氯沙坦）作为阳性对照，体内观察复肝丸调控RAS、抑制HSC活化的分子机制；体外采用AngII诱导肝星状细胞活化模型，观察复肝丸对RAS关键分子靶标以及HSC增殖、活化及表型转化的影响，从调控RAS再平衡的角度初步阐明复肝丸抗肝纤维化的作用机制，为研发防治肝纤维化的中药新药提供科学依据。

肝纤维化是肝脏对多种慢性损伤的一种修复愈合反应，是慢性肝病向肝硬化发展的必经过程，属可逆性病变，阻断、抑制或逆转肝纤维化是治疗慢性肝病的重要目标。肾素-血管紧张素系统（RAS）失衡在肝纤维化发生中有极其重要的作用，而调控RAS中ACE-Ang II-AT1轴与ACE2-Ang（1-7）-Mas轴之间的再平衡成为抗肝纤维化的新靶点。复肝丸是临床经验方，前期研究表明具有显著抗肝纤维化的作用。在本研究中，我们对复肝丸在体内外对RAS再平衡调控的抗肝纤维化机制进行了部分研究。结果发现，复肝丸能够明显减轻二甲基亚硝胺（DMN）诱导的大鼠肝纤维化，抑制AT-1受体的表达，上调Mas受体表达。为进一步明确复肝丸抗肝纤维的有效组分，我们对复肝丸的有效组分进行了初步研究，结果发现欧当归内酯（Lev A）在体外能够显著抑制星状细胞增殖及活化，而对其无显著细胞毒性反应，能够抑制血管紧张素2（Ang II）诱导的大鼠肝星状细胞HSC-T6的增殖及活化。进一步研究发现， Lev A能够显著抑制Ang Ⅱ诱导的AT1受体上调及ERK和c-jun的磷酸化，在动物体内，Lev A能够降低血清Ang Ⅱ水平，抑制AT1受体水平及ERK的磷酸化。本研究的结果提示，复肝丸能够通过调控RAS系统的再平衡发挥抗肝纤维化作用，其能够抑制ACE-Ang II-AT1信号轴及其下游ERK、c-Jun信号传导，进一步研究发现，欧当归内酯是复肝丸的活性成分之一。研究结果为从调控RAS再平衡的角度初步阐明复肝丸抗肝纤维化的作用机制，推广复肝丸在肝纤维化治疗中的应用、研发防治肝纤维化的中药新药提供了初步的实验依据。