microRNA194 在糖尿病肾病肾间质纤维化中的作用及分子机制

肾间质纤维化(TIF)是糖尿病肾病发展到ESRD的最主要病理改变，肾小管上皮细胞转分化(EMT)是TIF的早期且可逆阶段，而TGF-β1在这一过程中起重要作用，SARA则是TGF-β/Smad信号传导的关键衔接蛋白。我们前期研究发现在高糖诱导的肾小管上皮细胞EMT过程中SARA表达下调，但其机制不清。而microRNA在线分析软件提示microRNA194可能与SARA的表达调控有关。本课题将以miRNA194为着眼点，从临床、体内、体外多个角度观察miRNA194在肾小管上皮细胞中的表达，分析其与TGF-β1、SARA及EMT相关蛋白表达的关系，研究miRNA194表达的调控机制，揭示miRNA194在糖尿病肾病TIF中的作用及分子机制，探讨靶向miRNA194防治糖尿病肾病TIF的策略，为探明糖尿病肾病TIF的发生机制及防治提供新的理论依据。

糖尿病肾病（Diabetic Nephropathy，DN）既是糖尿病（Diabetes Mellitus，DM）的主要微血管病变之一，也是终末期肾病（End-stage renal disease，ESRD）的主要病因之一。糖尿病肾病强调早期诊断与治疗，如果不及时干预，将导致肾小球硬化及肾间质纤维化(Tubulointerstitial fibrosis, TIF)，最终发展为肾衰竭直至终末期肾病(End-stage renal disease, ESRD)。肾小管上皮细胞转分化(Epithelial to mesenchymal transition, EMT)不仅是TIF的始动环节，而且也是其可逆阶段，所以有关肾小管上皮细胞转分化的研究一直是肾纤维化防治的一个热点。最近发现有多种microRNA参与EMT过程，但机制尚不明确..miR-302a-3p是miR-302家族中的一员，我们经过miRNA基因芯片筛查发现miR-302a-3p在高糖刺激的HK-2细胞中表达上调，说明它可能参与高糖诱导的肾小管上皮细胞转分化过程。进而通过细胞实验，我们发现在高糖诱导HK-2细胞转分化过程中，ZEB1mRNA表达先下降后升高，12h下降最明显，其蛋白表达先下降后升高，在24小时表达量最低。同时，miR-302a-3p表达呈上升趋势，12h表达上调达高峰。为进一步揭示miR-302a-3p与ZEB1的关系，我们通过体外实验，转染miR-302a-3pMimic及Inhibitor至HK-2细胞，研究结果提示在高糖状态下，过表达miR-302a-3p可逆转HK-2细胞转分化，而抑制miR-302a-3p表达可促进其转分化，且这一过程可能与ZEB1相关；miR-302a-3p可能通过ZEB1对高糖诱导的HK-2细胞转分化起保护作用。而在动物实验中，我们也发现糖尿病肾病大鼠miR-302a-3p与ZEB1的表达呈负相关。在糖尿病肾病患者血浆中，我们也发现miR-302a-3p的表达上调。.通过本研究，我们认为miR-302a-3p可能通过靶向调节ZEB1的表达，参与调节糖尿病肾病肾小管上皮细胞转分化及肾间质纤维化。.本研究共发表论文3篇，已投稿SCI 论文2篇，培养硕士研究生2名，一名已毕业。