人巨细胞病毒潜伏相关膜抗原（UL138）多表位嵌合疫苗及其免疫效应研究

人巨细胞病毒（HCMV）感染十分普遍，尤其对胎儿及免疫力低下者构成严重威胁。疫苗则是其防治的根本途径，但目前在研的各类疫苗免疫保护效果欠佳，且无法清除处于潜伏状态的病毒。本研究拟选择HCMV在潜伏期特异表达的潜伏相关膜蛋白UL138，通过对其CTL和B细胞表位的预测、筛选和鉴定确定表位基因，同时选择具有安全有效、可形成病毒样颗粒（VLPs）的人乳头瘤病毒（HPV 6b）L1为载体，将筛选的表位基因替代或插入到L1蛋白的羧基端，制备HPV6b L1/HCMV- UL138多表位嵌合VLPs，并探讨其刺激机体产生的免疫效应及免疫保护。目的是使HCMV多表位嵌合VLPs能刺激机体免疫系统同时产生HCMV特异性的抗体反应和CTL反应，从而达到清除HCMV潜伏感染的目的。本研究拟从潜伏期这一全新角度探讨HCMV感染的防治，为HCMV有效疫苗的研制及开发提供理论和实验依据，具广阔的应用前景。

人巨细胞病毒（HCMV）感染十分普遍，尤其对胎儿及免疫力低下者构成严重威胁。疫苗则是其防治的根本途径，但目前在研的各类疫苗免疫保护效果欠佳，且无法清除处于潜伏状态的病毒。本研究选择HCMV 在潜伏期特异表达的潜伏相关膜蛋白UL138，建立了全新的检测HCMV病毒潜伏感染的方法，分析人群中HCMV感染情况，发现正常人群外周血细胞中普遍存在HCMV潜伏感染。在此基础上采用免疫信息学对UL138蛋白的CTL 和B 细胞表位进行筛选并结合实验，验证了四条HLA-A2限制的CTL表位肽和三条优势线性B细胞表位。根据表位筛选验证结果，选择具可形成病毒样颗粒（VLPs）的人乳头瘤病毒（HPV16）L1 为载体，分别将富含CTL表位的AA15-27和富含B细胞表位的AA96-138片段插入到HPV16-L1 蛋白的羧基端，利用毕赤酵母表达系统成功表达并纯化了HPV16 L1/HCMV- UL138 多表位嵌合VLPs。免疫效应分析显示，HPV16 L1/HCMV- UL138 多表位嵌合VLPs能有效诱导特异性体液免疫和细胞免疫。利用表达HCMV-UL138 抗原的重组腺病毒评价HPV16 L1-HCMV-UL138多表位嵌合VLPs的体内免疫保护效应显示，HPV16 L1-UL138嵌合VLPs免疫后均有效降低组织中重组腺病毒的数量。本研究拟从潜伏期这一全新角度探讨HCMV 感染的防治，为HCMV 有效疫苗的研制及开发提供理论和实验依据，具广阔的应用前景。