Periostin通过整合素通路参与子宫内膜异位症发生的机制研究

The endometrial cells have the ability of adhesion,invasion and angiogenesis, which plays important role in the development of endometriosis (EMs).Periostin（PN）belongs to cell adhesion proteins. Recent studies reported that it was related to the invasion and migration of cancer. But there was no report about PN in EMs. Our previous study showed that PN was highly expressed in endometrial tissues of EMs patients.When treated with recombinant Periostin,the expression of p-AKT and MMP-2 were upregulated in endometrial stromal cells(ESC),and the ability of ESC to adhere and migrate were accelerated.The effects were visibly attenuated by anti-αvβ3.Thus,we infer Periostin can enhance the expression of MMP-2 and the adhesion and migration ability of ESC via integrin αvβ3-AKT pathway,which plays important role in the pathogenesis of EMs. We intend to investigate the effect of the PN/αvβ3-AKT pathway in the pathogenesis of EMs in cell experiments, and go deep into its mechanism. We'll collect the pelvic fluid, serum,ectopic and eutopic endometrium of EMs patients,test and verify the expression or activation of factors involved in the PN/αvβ3 pathway. Our study aims to reveal the molecular mechanism of PN paticipate in the pathogenesis of EMs,investigate new target to treat EMs, and provide new target treatment for endometriosis.

异位内膜组织粘附、侵袭及血管新生是子宫内膜异位症（EMs）形成的关键。Periostin（PN）是一种细胞粘附蛋白，新近研究发现其与肿瘤的侵袭转移有关，但其是否参与EMs的发生尚无报道。我们前期研究显示PN在人EMs间质细胞中高表达；重组PN可增强内膜间质细胞的粘附侵袭能力，增加胞内p-AKT及MMP-2的表达；抗体封闭αvβ3可使效果明显降低。提示PN可能通过αvβ3-AKT通路上调MMP-2，促进细胞的粘附侵袭能力，参与EMs发生。我们拟通过细胞实验研究PN/αvβ3-AKT信号通路在EMs发生中的作用，并对其机制进行探讨；分别阻断PN/αvβ3-AKT信号通路中各相关因子，研究其靶点治疗效果。收集EMs患者盆腔冲洗液、血清及手术组织标本，验证PN/αvβ3-AKT通路相关因子的表达，评估PN与EMs的关系；本课题拟揭示PN在EMs发生中的作用机制，探讨治疗EMs的新靶点，为临床治疗EMs提供新的思路。

Periostin是一种分泌性蛋白，其在肿瘤的侵袭转移中发挥着重要的作用。我们前期试验发现Periostin在子宫内膜异位症（EMs）患者在位及异位内膜中的表达均增高，且其表达随月经周期改变，增值期高于分泌期。进一步试验发现，EMs患者腹腔冲洗液及血清中Periostin的表达水平均高于对照组，且血清Periostin与血清CA-125的表达水平呈正相关。由此，推断血清检测Periostin可能成为EMs新的标记物。细胞试验证实，Periostin在EMs患者的在位和异位子宫内膜间质细胞中表达上调，其促进了细胞的粘附和侵袭转移，有利于EMs的发生；且Periostin通过整合素αvβ3-ILK1-AKT通路促进子宫内膜间质细胞的粘附、侵袭转移能力。作为整合素通路中重要的负性调节蛋白，ILKAP在整合素通路中发挥重要作用。我们研究发现ILKAP在EMs患者在位及异位内膜中的表达低于正常内膜，异位内膜中表达最低。新近研究发现Periostin在促进上皮间质转化（EMT）中发挥着重要的作用，并参与多种肿瘤的侵袭转移。因此，我们进一步检测了EMs中Periostin/整合素通路及EMT相关蛋白的表达。Periostin能够通过Periostin/整合素αvβ3-ILK1通路促进EMT从而参与EMs的发生。ILK1下游p-Akt、p-GSK-3β和p-Erk通路均被活化，且EMT转录因子Zeb1、Snail及其下游MMP-2、MMP-9的表达均上调。因此，Periostin能够通过整合素αvβ3-ILK1/p-Akt/p-GSK-3/p-Erk通路上调转录因子Zeb1、Snail及其下游MMPs的表达，促进 EMT进而参与EMs的发生。随着对EMT研究的深入，发现EMT在细胞侵袭转移中发挥着重要的作用。本课题组进一步对卵巢癌细胞株进行研究，发现选择性Cox-2抑制剂Celecoxib能够通过p-AKT和p-ERK信号通路上调ZEB1的表达进而诱导卵巢癌A2780、SKOV3细胞发生EMT。综上，血清检测Periostin可能成为EMs新的标记物，且Periostin可能成为EMs治疗的新靶点。