Bach2表达下调对Tfh细胞分化活化的调控及其在系统性红斑狼疮发生发展中的作用及机制研究

Systemic lupus erythematosus (SLE) is a life threatening autoimmune disease. The mechanism for pathogenesis and development still remains unclear. Recent years, studies have revealed that follicular helper T cells (Tfh), a newly discovered subset of CD4+T cells, can promote B cell maturation, its increased frequency in circulating was found correlated with the pathogenesis of SLE. Our previous study showed the expression of Bach2 was significantly down-regulated in both SLE CD4+T cells and Tfh cells, and Bach2 TSS area was hypermethylated in SLE patients. Therefore, we hypothezise: abnormal epigenetic modification regulates the expression of Bach2, further affects Tfh cells’ differentiation and activation, which contributes to the pathogenesis of SLE. To address the hypothesis, this project aims to confirm the abnormal expression of Bach2 in SLE Tfh cells, then overexpressing or interferring the expression of Bach2 in vitro condition to evaluate the effect in SLE Tfh cells’ differentiation and activation. This study will further enrich the role of Bach2 in SLE, and provide a novel way and new targets for the treatment of disease.

系统性红斑狼疮（SLE）是一种严重危害人类健康的自身免疫性疾病，其发病机制尚不明确。近年来研究表明，CD4+T细胞亚群中的一种滤泡性辅助型T细胞（Tfh）可以促进B细胞成熟，同时Tfh细胞在外周血中比例升高与SLE发病有密切关系。我们的前期研究发现SLE患者CD4+T细胞及Tfh细胞分化活化中Bach2表达均是显著下降的，同时Bach2基因转录起始位点区域平均甲基化水平是升高的。为此我们提出：表观遗传修饰异常调控Bach2表达，进而可调控Tfh细胞分化活化，在SLE发生发展中发挥作用。本项目拟通过鉴定SLE Tfh细胞分化中Bach2表达异常，体外实验沉默和过表达Bach2对Tfh细胞分化活化、功能及自身免疫反应的影响，同时寻找导致Bach2表达异常的表观遗传学机制来证实这一假说。该研究将进一步丰富对Bach2在SLE发生发展机制中的作用，为SLE的治疗提供新途径和有效靶点。

系统性红斑狼疮（SLE）是一种严重危害人类健康的自身免疫性疾病，其发病机制尚不明确，目前认为与基因的易感性和异常的表观遗传学修饰所致T、B细胞的分化及活化异常有关。Bach2是bZip家族的转录因子，诸多GWAS研究结合Meta分析证实Bach2与众多免疫相关性疾病的发生有关，可参与B细胞向浆细胞的分化调节以及维持幼稚T细胞状态等，进而维持免疫激活与免疫耐受之间的平衡，防止炎症性疾病的产生。本研究发现SLE患者CD4+ T细胞的Bach2水平高于健康对照（NC），在效应T细胞亚群（Effector T、Tfh Like、Active Tfh Like）及辅助T细胞亚群（Th1、Th2、Th17、Treg）中SLE患者的Bach2表达水平均高于NC。SLE患者Bach2启动子区域甲基化水平下调是机制之一。CD4+ T细胞亚群中Bach2水平与SLE疾病活动度呈负相关关系。效应T细胞亚群及辅助T细胞亚群中Bach2水平与dsDNA呈负相关。可能由于SLE患者CD4+ T及其亚群中Bach2表达负反馈上调，抑制T细胞功能亚群的终末分化，减少Effector T、Tfh Like、Active Tfh Like细胞终末分化并抑制其功能，减少辅助T细胞对B细胞的异常激活。此外，Tfh Like细胞亚群中肾功能未受损患者Bach2显著高于肾功能受损患者及NC，提示Tfh Like细胞中Bach2参与影响肾功能并可能起到保护作用。Bach2在CD4+ T细胞亚群的表达水平与SLE患者外周血淋巴细胞计数呈显著负相关，SLE患者高表达Bach2可能影响淋巴细胞在外周血的分布或影响其增殖。综合上述结果，推测Bach2在SLE患者CD4+ T细胞中起抗炎保护作用。同时，在CD19+ B细胞、Naïve B细胞、Plasma细胞、Memory B细胞和Transcript B细胞中SLE患者的Bach2均表达上调。CD19+ B细胞中Bach2水平与SLEDAI评分无显著相关性，而CD19+ B及Naïve B细胞中Bach2水平与ANA、dsDNA呈正相关。结合既往研究提示Bach2在SLE患者B细胞亚群中扮演着致病作用。本项目研究结果进一步丰富Bach2在自身免疫性疾病中的功能研究，同时进一步扩展认识SLE发病机制，为进一步探索SLE的治疗方法、研究 SLE新的治疗靶点提供了理论依