白念珠菌多分子耐药机制的研究及ERG11基因点突变芯片的制备

念珠菌感染率的逐年上升和耐药菌株的不断出现，成为控制医院内感染的难点之一。收集临床分离的一系列对唑类敏感和耐药的白念珠菌，对其基因组DNA进行RFLP分析，并用PCR-SSCP方法筛选点突变的ERG11基因，转染酿酒酵母的高敏株，以确证其突变对于耐药的临床意义。同时用Northern杂交和RT-PCR分别对靶酶（ERG11）和药物流出通道（CDR1，CDR2，MDR1）基因的mRNA进行定性和定量分析，确定其mRNA与细胞内药物蓄积浓度间的关系，在以上研究的基础上，收集和合成ERG11点突变的基因片段开发用于检测白念珠菌靶酶突变的基因芯片，探索白念耐药株的快速检测手段；并为指导临床用药和新药研制提供依据。