白念珠菌锌指转录因子Fcr1p调控多药耐药基因的研究

在生物信息学分析的基础上，采用基因敲除技术，将白念珠菌锌指转录因子FCR1等位基因敲除，研究FCR1敲除对多药耐药基因转录调控的影响，及对特异性蛋白底物敏感性的变化。进一步地，采用定点突变技术，使Fcr1p C-末端保守区域的关键位点发生L435W和L438Q的点突变，在敲除PDR1、PDR3的酿酒酵母和敲除FCR1的白念珠菌中表达，利用lacZ融合表达载体报告系统和核酸杂交技术，检测FCR1突变与多药耐药基因转录活性之间的关系，测定药物敏感性变化。证明Fcr1p对多药耐药基因的调控作用，明确与Fcr1p调控活性相关的关键性残基，阐明白念珠菌耐药性产生的分子机理，为克服真菌耐药性、设计新型靶酶抑制剂奠定理论基础。