间充质干细胞调控肿瘤微环境对乳腺癌化疗耐药影响的机制研究

Researchers pay more attention to the influence of tumor microenvironment on the role of chemotherapy resistance in breast cancer, but the exact mechanism is still unclear. Our previous study found that there are a lot of mesenchymal stem cells (MSCs) in breast cancer microenvironment. MSCs stimulated by inflammatory cytokine may induce resistance to chemotherapy in breast cancer cells, which may be associated with cancer cell autophagy. This topic will be verified on the basis of preliminary results, by liquid chips and RNA interference screening and verification of key molecules secreted by MSCs promote autophagy in vivo and in vitro experiments by PCR, westernblot and others molecular biology techniques to explore the role of these key molecules. Inhibit these key molecules and find the viability of combined with chemotherapy to treat breast cancer. At the same time, analysis of the content of MSCs, key molecular and level of autophagy in breast cancer cells，the results showed that the feasibility of them to be the prognostic evaluation for breast cancer chemotherapy.Thereby clarify the mechanism of MSCs impact chemotherapy resistance of cancer cells in breast cancer microenvironment and hope to explore new target for breast cancer treatment.

肿瘤微环境对乳腺癌化疗抵抗的影响越来越受到研究者的重视，但具体的机制尚不明确。我们的前期研究发现乳腺癌肿瘤微环境中存在着大量的间充质干细胞（MSCs），MSCs在炎症因子刺激下可能诱导乳腺癌细胞发生化疗抵抗，其机制可能与肿瘤细胞发生自噬相关。本课题将在核实验证前期结果基础上，通过液相芯片及RNA干扰等筛选并验证肿瘤微环境中MSCs分泌的促进自噬的关键分子，并在体内、体外试验中通过PCR、westernblot等多种分子生物学技术探讨这些关键分子作用，以及抑制这些关键分子后再联合化疗治疗乳腺癌的可行性。同时在临床标本中分析MSCs数量与关键分子含量及乳腺癌细胞自噬水平三方面的相关性，进而探讨MSCs数量及关键分子含量作为乳腺癌化疗预后评价指标的可行性。从而阐明乳腺癌微环境中MSCs影响乳腺癌细胞化疗抵抗的机制，以期探索乳腺癌治疗新靶点。

肿瘤微环境对乳腺癌化疗抵抗的影响越来越受到研究者的重视，但具体的机制尚不明确。我们的前期研究发现乳腺癌肿瘤微环境中存在着大量的间充质干细胞（MSCs），MSCs在炎症因子刺激下可能诱导乳腺癌细胞发生化疗抵抗，其机制可能与肿瘤细胞发生自噬相关。我们也进行了缺氧因子HIF-1基因以及自噬在乳腺癌耐药方面的研究，但在研究过程中发现类似的研究成果已被发表，遂我们更改了研究方向。进一步探索MSCs对乳腺癌生长、转移的影响的部分机制，这些方面都可能是导致乳腺癌细胞化疗耐药的因素。同时在对MSCs的研究中，我们也分析了GEO数据库中的相关芯片信息，发现MSCs分泌的外泌体（MSCs-Exos）可能在乳腺癌的耐药中发挥了更为重要的作用。MSCs-Exos被新生乳腺癌细胞摄取，经过某些调控作用导致乳腺癌细胞对化疗药物的敏感性降低，而在低剂量化疗药物阿霉素（Dox）的诱导下，这种作用更明显。随后我们通过生物信息学技术筛选可能参与MSC-exo影响乳腺癌耐药的关键基因，并结合文件检索的结果。发现S100A6基因可能是影响乳腺癌细胞耐药关键基因。而MSCs-Exos 携带的Mir-21-5p基因就是调控外泌体及乳腺癌细胞中S100A6基因表达变化的重要因素。Dox诱导MSCs产生的外泌体（Dt-MSC-exo）其Mir-21-5p基因表达明显上升，结果使得乳腺癌细胞中S100A6的表达也相应上调，乳腺癌细胞耐药能力上升。而在MSCs中沉默Mir-21-5p也会降低BCs中S100A6表达，并同时降低乳腺癌细胞对Dox的耐药。本研究结果探索了乳腺癌微环境中MSCs影响乳腺癌细胞化疗抵抗的机制，以期为寻找降低乳腺癌细胞耐药新靶点提供一定的理论依据。