日本血吸虫单克隆抗体可变区基因片段的克隆及序列测定

本研究根据国内外有关抗体可变区基因研究资料设计并合成用于PCR扩增日本血吸虫单抗可变区基因的两对通用引物。首先通过下游引物分别逆转录（RT）合成SM21-3及3D8A两株细胞的cDNA，然后进行PCR扩增获得了SM21-3VH基因片段及3D8AVL基因片段。将SM21-3VH基因片段纯化后克隆至M13噬菌体，转化大肠杆菌，筛选阳性克隆，用双脱氧末端终止法测定其DNA序列，其大小与结构符合鼠源性单抗VH基因。该课题属国内首次系用RT-PCR及分子克隆手段对日本血汲虫单抗V基因进行基因水平的初步分析和研究。通过该项研究建立了快速克隆单抗V基因片段的方法，为进一步开展日本血吸虫抗体基因工程的研究及免疫球蛋白分子遗传学的研究奠定了基础。