基于微生物-肠-脑轴探讨ADHD与免疫的关系及安神定志灵的干预作用

The research project, based on the Brain-Gut-Microbiota Axis theory, supported by clinical research and animal experiments, is to discuss the relationship between ADHD and immune system, and the interventional effect of Anshen Ding Zhi Ling decoction. Using relative experimental approaches in metabonomics and molecular biology, samples of stool, plasma and brain tissue were analyzed. The changes of inflammation markers in therapeutic process were tested to analyze its correlation with intestinal flora and endogenous metabolites, so as to establish the relationship among ADHD, enteric microorganisms, and immune system. This project is also to discuss the effect of Anshen Ding Zhi Ling decoction on children’s intestinal flora, endogenous metabolites and immune system, and its mechanism of regulating immune function in central nervous system. Using the theory, the relationship between ADHD and immunity can be clarified and the interventional effect can be expounded, which may provide a new research orientation for the nosogenesis of ADHD.

本课题拟在“微生物-肠-脑轴”理论指导下，结合临床研究和动物实验，探讨ADHD与免疫的关系及安神定志灵的干预作用。运用代谢组学及分子生物学相关实验方法对粪便、血浆、脑组织等样本进行分析，了解肠道菌群和内源性代谢产物的种类，研究与疾病相关的差异性指标；检测疾病治疗过程中炎症指标的变化，分析其与肠道菌群及内源性代谢物的相关性，初步建立肠道微生物、免疫系统和ADHD之间的联系。同时探索安神定志灵对ADHD儿童肠道菌群、内源性代谢产物、免疫系统的影响及其调节中枢神经免疫的作用机制。最终通过微生物-肠-脑轴初步阐明ADHD与免疫的关系及安神定志灵的干预作用，为ADHD的发病机制研究提供新的思路。

注意缺陷多动障碍（ADHD）是儿童期常见的神经发育障碍性疾病，根据前期临床观察和文献研究，我们发现ADHD可能与免疫-炎症及微生物-肠-脑轴相关。为了解ADHD肠道菌群和内源性代谢产物的异常，探索ADHD的免疫-炎症发生机制及安神定志灵的干预作用，我们分别进行临床实验和动物实验，运用代谢组学、菌群分析、动物行为学和多种分子生物学等实验方法进行了深入研究。通过研究我们发现：安神定志灵可回调ADHD患儿粪便中的Butyricicoccus、Erysipelotrichaceae_UCG-003、Enterococcus等菌属的水平，并影响粪便中丙氨酸、天冬氨酸、谷氨酸代谢，β-丙氨酸等代谢通路；可降低ADHD模型鼠（SHR大鼠）肠道中脱硫弧菌属、Ruminiclostridium_9等丰度，调整肠道内容物中精氨酸生物合成、芳香族氨基酸代谢，影响单胺类神经递质合成；可影响ADHD患儿血浆中精氨酸生物合成、谷氨酸和谷氨酰胺代谢，平衡血浆中谷氨酸及谷氨酰胺的水平；降低SHR大鼠血浆中支链氨基酸的含量，通过减少竞争受体的方式上调进入脑组织的芳香族氨基酸，从而调节前额叶和纹状体中兴奋性神经递质和抑制性神经递质的平衡，发挥治疗作用。此外，安神定志灵能够改善ADHD患儿外周血IL-1β、IL-6、IL-10等炎症因子的异常，并且能够通过抑制小胶质细胞、星形胶质细胞等免疫细胞过度激活，改善免疫功能失衡，修复血脑屏障损伤，抑制MAPK、NF-κB等炎症相关信号通路达到调控神经炎症的目的，从而改善SHR大鼠的ADHD行为特征，发挥对ADHD的治疗作用。安神定志灵可能通过调整菌群的生态平衡，调节谷氨酸代谢、芳香族氨基酸代谢、支链氨基酸代谢，发挥对免疫系统和神经炎症的干预作用。这些研究初步揭示了安神定志灵对ADHD微生物-肠-脑轴及免疫-炎症的作用靶点，并提示：慢性神经炎症可能是ADHD心肝火旺证的现代医学内涵。本研究为后续中医药对ADHD免疫机制的研究奠定了基础，为中医药治疗ADHD提供了更多理论依据。同时，也为中医证候的现代医学内涵的研究提供了参考。